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上海士鋒生物科技有限公司
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26 2016－4

細(xì)胞總RNA的提取

一、準(zhǔn)備1、物品：Trizol、氯仿（三氯甲烷）、異丙醇、75%滅酶異醇、冷PBS、1.5ml滅酶EP管、滅酶槍頭、一次性手套、EP管架、吸管2、打開冷凍離心機4℃預(yù)冷二、操作步驟：將Trizol、氯...

25 2016－4

核酸探針標(biāo)記

一、探針的類型核酸分子探針是指用放射性核素或其他標(biāo)記物標(biāo)記的、能與特定的靶分子發(fā)生特異性相互作用的DNA或RNA片段。1．基因組DNA探針：病毒DNA等2．cDNA探針；zui常用3．寡核苷酸探針：1...

19 2016－4

聚合酶鏈反應(yīng)一單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析

聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析（SingleStrandConformationPolymorphismAnalysisofPolymeraseChainReactionProducts,PCR-S...

14 2016－4

熒光實時定量PCR 技術(shù)初探

少量的DNA序列的準(zhǔn)確定量曾經(jīng)是一件很難很累的事情，不過realtimePCR的出現(xiàn)把它變?yōu)楹推胀≒CR差不多一樣容易。原理是利用能特異標(biāo)記PCR產(chǎn)物的熒光物質(zhì)，顯示PCR產(chǎn)物的動態(tài)累積，得到S型的擴(kuò)...

6 2016－4

RNA提取與RT

在做Northern等雜交實驗、構(gòu)建cDNA文庫、獲取能夠編碼真核生物蛋白的基因、獲得RNA病毒基因時，會用到RNA提取和RT-PCR技術(shù)。真核生物的基因組是DNA，為什么不直接從DNAPCR得到我們...

30 2016－3

DNA測序常見問題分析及解決辦法總結(jié)

常見問題具體情況可能的原因處理辦法備注樣品準(zhǔn)備問題菌培養(yǎng)不好或失敗抗性不對或菌已死核對抗性，盡可能提供載體信息?；蚓囵B(yǎng)條件特殊重新提供菌液，或提供2ug純化質(zhì)粒。質(zhì)粒提不出質(zhì)?？截悢?shù)極低或客戶自己采...

28 2016－3

轉(zhuǎn)染到單克隆化的總結(jié)

篩選之前確定G418濃度：1，由于每種細(xì)胞對G418的敏感性不同，而且不同的廠家生產(chǎn)的G418有效成分的比重不同，一般1g的粉劑中有效的G418含量大約為0.722g。2，G418是新霉素的類似物，兩...

23 2016－3

基因轉(zhuǎn)染與實驗設(shè)計原則

磷酸鈣-DNA共沉淀法核酸以磷酸鈣-DNA共沉淀物的形式出現(xiàn)時，可使DNA附在細(xì)胞表面，利于細(xì)胞吞入攝取，或通過細(xì)胞膜脂相收縮時裂開的空隙進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，進(jìn)入細(xì)胞的DNA僅有1%～5%可以進(jìn)入細(xì)胞核中，其...

17 2016－3

CTAB Procedure

Inthehood:96welldishwithbacteriatitertechmicrotubesglasspipetteRemovecoloniesfromeachwellusingthetit...

15 2016－3

差異表達(dá)基因克隆技術(shù)的新進(jìn)展

提要分離并克隆差異表達(dá)基因是目前功能性基因研究的熱點。mRNA差異展示是篩選差異表達(dá)基因zui有效的技術(shù)之一，它的主要不足是有一定假陽性。RDA、SSH、DSD、LSH技術(shù)能夠克服假陽性，但也具有一定...

7 2016－3

分子標(biāo)記常見問題及其對策

1顯性標(biāo)記與選擇效率一部分分子標(biāo)記系統(tǒng)如RAPD、AFLP具有顯性或部分顯性的特點，無法區(qū)分基因是純合還是雜合，不能提供完整的遺傳信息。Haley等（1994）提出相斥相（Repulsion－phas...

29 2016－2

基因轉(zhuǎn)染（磷酸鈣

核酸以磷酸鈣-DNA共沉淀物的形式出現(xiàn)時，可使DNA附在細(xì)胞表面，利于細(xì)胞吞入攝取，或通過細(xì)胞膜脂相收縮時裂開的空隙進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，進(jìn)入細(xì)胞的DNA僅有1%～5%可以進(jìn)入細(xì)胞核中，其中僅有不到1%的DNA...

22 2016－2

質(zhì)粒的提取和制備

溶液配制（一）lb培養(yǎng)基每1000mL加分析純NaCl10g，蛋白胨10g，酵母粉5g，用ddH2O配制，再用10MNaOH調(diào)pH至7.4（100mL一般加450µL），高溫高壓蒸汽滅菌1...

27 2016－1

菌落PCR（Colony PCR）方法

菌落PCR（ColonyPCR）可不必提取基因組DNA，不必酶切鑒定，而是直接以菌體熱解后暴露的DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，省時少力。建議使用載體上的通用引物。通常利用此方法進(jìn)行重組體的篩選或者DNA...

25 2016－1

分離基因的方法

在已知基因部分核苷酸序列或全部核苷酸序列的情況下，基因的制備方法主要可分為兩大類：一類是基因化學(xué)合成法，一類是基因生物制備法。一般又可將基因生物制備法分為基因組文庫法、cdna文庫法和PCR法等。1化...

78910111213共18頁,265條記錄 跳轉(zhuǎn)

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