細(xì)胞名稱  人肝癌細(xì)胞系；HCCIH01復(fù)蘇
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況  C5
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  未定

來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
CES3    羧酸酯酶3抗體
CES4A    羧酸酯酶4A抗體
CES6    羧酸酯酶6抗體
Cezanne    Cezanne蛋白抗體
CFC1    內(nèi)臟移位線管蛋白CFC1蛋白抗體
CFHL2    補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白2抗體
CFHL4    補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白4抗體
CFHL5    補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白5抗體
CG028/C7orf28A    7號染色體開放閱讀框28A抗體
CGBP    CpG結(jié)合蛋白抗體
CGGBP1    CGG結(jié)合蛋白1抗體
CGK2    cGMP依賴蛋白激酶2抗體
CGNL1    結(jié)蛋白樣蛋白CGNL1抗體Additives Tyrosine Agar     SR0580     10支/盒        
Tyrosine Agar Base     HCM156     500g     用于蠟樣芽孢桿菌的L-*分解試驗。Tyrosine agar is used for tyrosine decompose test by B...    
*卵黃多粘菌素瓊脂平板（MYP）    28381     90mmX20個     用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64，GB/T4789.14-2003，SN0176-92和...    
血平板    24070     90mm×20個     用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10－2010，GB/T4789.37－2008 ，GB 4789.30－2...    
*卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)MYP    28380     250g     用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64，GB/T4789.14-2003，SN0176-92和...    
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基    24051     250g     可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測試、*的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟...    
酪蛋白瓊脂    28370     100g     用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗 (GB/T4789.28-2003中4.65，GB/T4789.14-2003)。    
胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基    28072     250g     用于普通的或營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)，還用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室無菌程度的監(jiān)測及消毒劑消毒效果的...    
半固體瓊脂    26050     250g     供細(xì)菌動力觀察、菌種保存等用(GB 4789.4－2010和GB/T4789.8－2008)。    
*基礎(chǔ)    24060     250g     加入脫纖維羊血或兔血，制成*，用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10－...    
動力—硝酸鹽培養(yǎng)基(A法)    22270     250g     用于鑒別細(xì)菌動力和硝酸鹽還原試驗(GB/T 8538-2008，GB/T4789.28－2003中4.72 ，GB/T4789.14－20...    
L-*營養(yǎng)瓊脂配套試劑     SR0580     10支/盒     L-*營養(yǎng)瓊脂基礎(chǔ)配套試劑