【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞；T-24使用說明書
形態(tài)特性 上皮樣細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于病人的轉(zhuǎn)移性細(xì)胞腺癌。有移行細(xì)胞癌的病人的白細(xì)胞和血清對(duì)T24和相關(guān)細(xì)胞株有細(xì)胞毒性。該細(xì)胞戲的倍增時(shí)間約為19小時(shí)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640（含2mM L-glutamine） (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代；3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO:10,12；D13S317:12；D16S539:9；D18S51:16,18；D19S433:13,14；D21S11:29；D2S1338:20,23；D3S1358:16；D5S818:10,12；D7S820:10,11；D8S1179:14；FGA:17,22；TH01:6；THOX:8,11；vWA:15,17；
同工酶 無
染色體 62-69
使用權(quán)限 A類
| 產(chǎn)品名稱 | 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞；T-24使用說明書 |
| 貨期 | 3－5天 |
| 發(fā)貨地 | 上海 |
復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
CM-R015 大鼠胰島細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R016 大鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R017 大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R018 大鼠頜下腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R019 大鼠腮腺細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R020 大鼠上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R033 大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R034 大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R035 大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R036 大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R037 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R038 大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R039 大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLARD7 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體
beta COP β衣被蛋白抗體
Caspase 4+Caspase 11 半胱胺酸蛋白酶4/11抗體
C1orf187 1號(hào)染色體開放閱讀框187抗體
C9orf61 9號(hào)染色體開放閱讀框61抗體
CTBP2 C末端結(jié)合蛋白2抗體
C21ORF13 21號(hào)染色體開放閱讀框13抗體
Coronin 3 冠蛋白3抗體
CNTD 細(xì)胞周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
CH25H *25羥化酶抗體
CCHAC1 陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控樣蛋白1抗體
CIDE A DNA斷裂因子相似蛋白A抗體
