產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
人腎透明細(xì)胞腺癌;786-0復(fù)蘇 | 貼壁生長(zhǎng) | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 人腎透明細(xì)胞腺癌;786-0復(fù)蘇
形態(tài)特性 上皮樣細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一個(gè)原發(fā)性透明細(xì)胞癌。 此細(xì)胞有微絨毛和橋粒,能在軟瓊脂是生長(zhǎng)。 此細(xì)胞生成的一個(gè)PTH樣的多肽與乳癌和肺癌中的肽相似。 這個(gè)多肽的N端與PTH相似,活性與PTH相似,分子量為6000道爾頓
培養(yǎng)條件 RPMI 1640(含2mM L-glutamine) (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR Amelogenin:XY;CSF1PO:10;D13S317: 8;D16S539: 12;D18S51: 13,14;D19S433: 14,15;D21S11: 29, 30;D2S1338: 17, 18;D3S1358: 16;D5S818:9;D7S820: 11,12;D8S1179:12,13;FGA: 24;TH01: 6, 9.3;THOX: 8,11;vWA:15,17;
同工酶 無(wú)
染色體 82-88
使用權(quán)限 A類
來(lái)源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
aspase-1 p20 天冬氨酸-*特異蛋白酶家族抗體
Calneuron 1 鈣營(yíng)養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8抗體
CABP5 鈣結(jié)合蛋白5/3抗體
SLC7A5 CD98輕鏈抗體
CLPS 胰輔脂酶抗體
C17orf104 17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框104抗體
CART 卡因和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄蛋白抗體
CCN1 富半*肝素結(jié)合蛋白61抗體
C2orf65 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框65抗體
CTNNBL1 β連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體CM-R021 大鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R022 大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R023 大鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R024 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R025 大鼠外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R026 大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R027 大鼠食管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R028 大鼠食管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R029 大鼠腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R030 大鼠腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R031 大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-R032 大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL