【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人腦多型膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；BT-325培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系于1985年由北京神經(jīng)外科研究所建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR Amelogenin：XY；D8S1179：13,15；D21S11：29,32.2；D7S820：12,13；CSF1PO：11, 13；D3S1358：15, 16；TH01：8, 9；D13S317：13；D16S539：9,11；D2S1338：24；D19S433：14,15.2；vWA：14；THOX：8,11；D18S51：14,21；D5S818：10；FGA：19,23。
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
| 產(chǎn)品名稱 | 人腦多型膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；BT-325培養(yǎng) |
| 貨期 | 3－5天 |
| 發(fā)貨地 | 上海 |
復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
CM-H071 人腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-H072 人腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-H073 人膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-H084 人臍靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-H085 人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-H086 人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-H087 人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-H088 人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-H089 人髂動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-H090 人血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-H091 人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CM-H092 人脈絡(luò)膜血管細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLC2orf57 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57抗體
C2orf29 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框29抗體
C3orf21 3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框21抗體
C1ORF74 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框74抗體
C1QTNF10 補(bǔ)體C1q和腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白10抗體
C1orf94 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框94抗體
CSNK1D 酪蛋白激酶δ1抗體
CD166 活化白細(xì)胞粘附分子抗體
C1orf191 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框191抗體
Cox A16 polymerase3D 柯薩奇病毒A16型聚合酶3D
