細胞名稱  人肝癌亞力山大細胞；PLC/PRF/5復蘇
形態(tài)特性   上皮細胞
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞系分泌乙肝病毒表面抗原（HBsAg）。 此細胞系原先被支原體污染，后用BM-cycline去除支原體。 
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法   消化5-10分鐘。1:2。3-4天長滿。
傳代情況  P(78+5)
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測  陰性
STR   Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:11,12；D16S539:13；D18S51:17；D19S433:11,13；D21S11:30,33.2；D2S1338:19,22；D3S1358:15；D5S818:12；D7S820:9,11；D8S1179:13,16；FGA:19.2,25；TH01:8；TPOX:8；vWA:15,16
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
改良Giolitti-Cantobi 肉湯    Modified Giolitti-Cantoni Broth    250    用于*的增菌培養(yǎng)
改良Camp-BAP氏瓊脂基礎    Camp-BAP Agar Base,Modified    250    用于彎曲桿菌選擇性分離培養(yǎng)(GB標準)
改良BPLS瓊脂    BPLS Agar，Modified    250    用于各種標本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標準)
副溶血性弧菌增菌液        250    用于副溶血性弧菌的增菌培養(yǎng)
副溶血性弧菌瓊脂        250    用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)
*           2.5萬單位/支*5    添加于100mlHB4131中
動力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎(MIU)     Motility Indol Urea Medium Base    250    用于細菌的復合生化試驗
膽鹽七葉苷瓊脂    Bile Esculin Agar    250    用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
膽硫乳瓊脂（DHL）     Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar    250    腸道菌選擇性培養(yǎng)基，特別是沙門氏菌的選擇性分離（GB、SN標準）
大腸菌群顯色培養(yǎng)基    Coliform Chromogenic Medium    1000ml    用于快速、準確檢測大腸菌群大腸菌群培養(yǎng)24小時，顯蘭色
布氏肉湯       Brucella Broth    250    用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標準)
布氏瓊脂       Brucella Agar    250    用于彎曲桿菌分離(SN標準)5HT5A receptor    英文名稱：    5-羥色胺受體5A抗體    ?0.2ml
5HT7 Receptor    英文名稱：    5-羥色胺受體7抗體    ?0.2ml
SCEL    英文名稱：    SCEL蛋白抗體    ?0.2ml
SPAG8    英文名稱：    相關抗原8抗體    ?0.2ml
SART1    英文名稱：    T淋巴細胞識別的鱗狀細胞癌抗原抗體    ?0.2ml
S100 alpha 2    英文名稱：    S100A2抗體    ?0.2ml
SPDYA    英文名稱：    細胞周期G2/M期快速誘導蛋白SPDYA抗體    ?0.2ml
5HT6 Receptor    英文名稱：    5-羥色胺受體6抗體    ?0.2ml
SMARCA2    英文名稱：    ATP依賴解旋酶SMARCA2抗體    ?0.2ml
SKP1    英文名稱：    S期激酶相關蛋白1抗體    ?0.2ml
SHFM3    英文名稱：    SHFM3蛋白抗體    ?0.2ml