細(xì)胞名稱  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY0926復(fù)蘇
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長特性  懸浮生長
特征特性   該細(xì)胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%NBS
傳代方法   1:2傳代；5-6天一次
傳代情況  P2
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  熒光法（-）
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

 來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
 細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
蘇操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
uAP12(Mouse apelin 12) ELISA Kit  小鼠apelin 12    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
IFN- Alpha(Mouse Interferon Alpha) ELISA Kit  小鼠α干擾素    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
Mouse rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit  小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
CA724(Mouse CA724) ELISA Kit  小鼠腫瘤標(biāo)志物    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
F II (Mouse coagulation factor II ) ELISA Kit  小鼠*Ⅱ    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
ET(Mouse endotoxin) ELISA Kit  小鼠內(nèi)毒素    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
ANP(Mouse Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit  小鼠心鈉肽    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
PPAR- Gamma(Mouse Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma) ELISA Kit  小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
TSST-1(Mouse toxic shock syndrome toxin) ELISA Kit  小鼠毒休克綜合征毒素1    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
CsA(Mouse Cyclosporine A) ELISA Kit  小鼠*A    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48T
C1INH(Mouse Complement 1 inhibitor autoantibody) ELISA Kit  小鼠補體1抑制物抗體    Multi-class antibodies    規(guī)格：     48Tphospho-c-Jun(Thr91+Thr93)    英文名稱：    磷酸化原癌基因c-Jun抗體    ?0.1ml
Jagged 2    英文名稱：    Notch配體Jagged 2蛋白抗體    ?0.2ml
Jarid1C    英文名稱：    組蛋白去甲基化Jarid1C抗體    ?0.1ml
JMJD1B    英文名稱：    組蛋白去甲基轉(zhuǎn)移酶JMJD1B抗體    ?0.1ml
Junctophilin-2    英文名稱：    親聯(lián)蛋白2抗體    ?0.2ml
KIF13B    英文名稱：    驅(qū)動蛋白家族蛋白13B抗體    ?0.2ml
KIF7    英文名稱：    驅(qū)動蛋白家族蛋白7抗體    ?0.2ml
KAT3A    英文名稱：    CREB結(jié)合蛋白抗體    ?0.2ml
KNDC1    英文名稱：    腦蛋白9抗體    ?0.2ml
Kindlin 2    英文名稱：    絲裂原誘導(dǎo)蛋白2抗體    ?0.2ml
 KLF17    英文名稱：    鋅指蛋白393抗體    ?0.2ml
KDM1    英文名稱：    組蛋白賴氨酸特異脫甲基酶1抗體    ?0.1ml
KIF11    英文名稱：    驅(qū)動蛋白樣蛋白1抗體（甲狀腺激素受體相互作用蛋白5）    ?0.2ml
KMT3B    英文名稱：    組蛋白甲基化KMT3B抗體（雄激素受體激活蛋白）    ?0.2ml