細胞簡介:
大鼠肺血管平滑肌分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。肺血管平滑肌細胞主要功能:①細胞表面表達介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細胞。肺血管平滑肌細胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關(guān)鍵因素,新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應(yīng),并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān)。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠肺血管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠肺血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 肺組織 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7002 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠紅細胞生成素受體(EPOR)試劑盒 ,英文名: EPOR ELISA Kit
Rabbit lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 兔淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒
漢坦病毒通用型(HTV-U)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMouseCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeIcollagen,ICTPELISAKit小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽
體液環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKit17-KS人17-同類固醇
豬血纖蛋白原試劑盒 豬血纖蛋白原試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬血纖蛋白原試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬血纖蛋白原試劑盒、豬血纖蛋白原eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒 豬血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒、豬血栓調(diào)節(jié)蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬血管性血友病因子試劑盒 豬血管性血友病因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬血管性血友病因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬血管性血友病因子試劑盒、豬血管性血友病因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬血管細胞粘附分子-1試劑盒 豬血管細胞粘附分子-1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬血管細胞粘附分子-1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬血管細胞粘附分子-1試劑盒、豬血管細胞粘附分子-1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Kelch樣蛋白14抗體
豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 試劑盒
Human maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒
RabbitangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 兔血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforai-HAV(Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody)ELISAKit人抗甲型肝病毒IgM抗體
血液D-乳酸比色法定量試劑盒20次
PorcineHistamine,HISELISAKit豬組胺(HIS)試劑盒
細胞分裂周期蛋白25抗體
NA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (His 標簽) Protein
phospho GAP-43(pSer41 0.5mgphospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 ) 0酸化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗原
SETD8重組人 SETD8 / PR-Set7 蛋白 Protein
BIN2 Protein Human 重組人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 (His 標簽)
CNTN2 Protein Human 重組人 Contactin 2 / CNTN2 蛋白 (His 標簽)
大鼠肺血管平滑肌細胞phospho GAP-43(pSer41 0.5mgphospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 ) 0酸化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗原
BIN2 Protein Human 重組人 BIN2 / BRAP-1 蛋白 (His 標簽)
NA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (His 標簽) Protein
CNTN2 Protein Human 重組人 Contactin 2 / CNTN2 蛋白 (His 標簽)
SETD8重組人 SETD8 / PR-Set7 蛋白 Protein