細胞簡介：
大鼠卵巢微血管內(nèi)皮分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu)，而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7-9微米，數(shù)量極多，成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細胞及一薄層基膜組成，厚約0.5微米。基膜外面有薄層結(jié)締組織，其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等。細的微血管由一個內(nèi)皮細胞圍成管腔，較粗的微血管由2-3個內(nèi)皮細胞圍成。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的微血管，內(nèi)皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱連續(xù)微血管。血管內(nèi)皮細胞在器官和組織的結(jié)構(gòu)和功能上起著非常重要的作用。并與多種疾病的發(fā)生與發(fā)展有關(guān)。近年來血管內(nèi)皮細胞在炎癥、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來愈受到人們的重視。研究發(fā)現(xiàn)，不同來源的內(nèi)皮細胞在生物學(xué)特征、結(jié)構(gòu)和功能等方面均存在一定差別，而同是微血管內(nèi)皮細胞，它們又存在器官和組織的特異性。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠卵巢微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的大鼠卵巢微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 卵巢 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8242 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 |
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠卵巢微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代步驟：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠酸性成纖維細胞生長因子(FGF1)試劑盒 ，英文名： FGF1 ELISA Kit
Mouse ferritin (FE) ELISA Kit 小鼠鐵蛋白(FE)試劑盒
ratEndothelin1,ET-1ELISAKit 大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforhiston-H2bELISAKit大鼠組蛋白H2b
細胞ROCK-I激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitPⅢNP大鼠Ⅲ型前膠原肽
細胞毒 T 淋巴細胞相關(guān)抗原 4(CTLA-4) 作用： ELISA
結(jié)締組織生長因子 (CTGF) 作用： ELISA
心肌營養(yǎng)素 -1(CT-1) 作用： ELISA
心肌鈣蛋白 I(cTnI) 作用： ELISA
乙醛脫氫酶16家庭A1抗體
小鼠(AZT)ELISA 試劑盒
Human acid sphingomyelinase (ASM) ELISA Kit 人酸性神經(jīng)鞘0脂酶(ASM)試劑盒
Humanplateletfactor3,PF3ELISAKit 人血小板因子3(PF-3)試劑盒 進口分裝
Humanarachidonate5-lipoxygenase,ALOX-5試劑盒人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)試劑盒
植物游離吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量試劑盒(包括萃取)20次
HumahyroidStimulatingHormone，TSHELISAKit人促甲狀腺素(TSH)試劑盒
piwi樣1蛋白抗體
EFNA2重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 標簽) Protein
Apo-E (Apolipoprotein E 0.5mgApo-E (Apolipoprotein E) 載脂蛋白E(抗原)
CXCL12重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) Protein
FCGRT & B2M Protein Human 重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白
REG3A Protein Rat 重組大鼠 REG3A 蛋白 (His 標簽)
大鼠卵巢微血管內(nèi)皮細胞Apo-E (Apolipoprotein E 0.5mgApo-E (Apolipoprotein E) 載脂蛋白E(抗原)
FCGRT & B2M Protein Human 重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白
EFNA2重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 標簽) Protein
REG3A Protein Rat 重組大鼠 REG3A 蛋白 (His 標簽)
CXCL12重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) Protein
