| 商品屬性：
組織來源 | 肺靜脈組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | YS-01X7061 | 生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
| 細(xì)胞介紹：
大鼠肺大靜脈內(nèi)皮分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個(gè)靜脈里流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應(yīng)性大的特點(diǎn)，肺動脈壓力高低取決于單位時(shí)間內(nèi)肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài)，必須保證整個(gè)肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細(xì)血管進(jìn)入肺靜脈，再入左心室，經(jīng)過左心室收縮進(jìn)入體循環(huán)，才能避免肺動脈內(nèi)壓力升高。細(xì)胞呈多邊形鵝卵石狀排列；該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。
| 方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺大靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
| 質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺大靜脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
| 培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
| 細(xì)胞培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 注意事項(xiàng)：
1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力，請拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度 80%左右時(shí)正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細(xì)胞僅供科研使用。
| 公司正在出售的產(chǎn)品
大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)試劑盒 ，英文名： u-T4 ELISA Kit
Rabbit iestinal fatty acid binding protein (iFABP) ELISA Kit 兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒
A組輪狀病毒(HRV-A)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMHCI/H-2I(MousemajorhistocompatibilitycomplexI)ELISAKit小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類
體液(UROKINASE)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitLS牛乳糖合成酶
豬圓環(huán)病毒2型抗體ELISA試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬乙型腦病毒抗體IgG試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬乙酰(ACh)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
BADH2(水稻)抗體
豬血清(NO)ELISA 試劑盒
Human myosin light chain (MLC) ELISA Kit 人肌球蛋白輕鏈(MLC)試劑盒
RabbitLebtospiraIgGELISAKit 兔鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAi-TG甲狀腺球蛋白抗體(TG抗體)
血液3-0酸甘油脫氫酶(GAPDH)活性酶動力比色法定量試劑盒20次
Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISAKit豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒
16號染色體開放閱讀框48抗體
PARP1重組小鼠 PARP-1 / PARP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白6(XRCC6)重組蛋白 Recombinant X-Ray Repair Cross Complementing 6 (XRCC6)
FUCA1重組人 FUCA1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BLMH Protein Human 重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HFE2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Hemojuvelin / HFE2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Discs大同源物關(guān)聯(lián)蛋白5(DLGAP5)重組蛋白 Recombinant Discs, Large Homolog Associated Protein 5 (DLGAP5)
BLMH Protein Human 重組人 BLMH / BLM hydrolase 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IFNG重組小鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CNTFR Protein Rat 重組大鼠 CNTFR / CNTFR-alpha 蛋白 (His 標(biāo)簽)
RTN4R重組人 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
