人低侵襲性脈絡膜黑色素素瘤細胞;OCM-1A特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞名稱 人低侵襲性脈絡膜黑色素素瘤細胞;OCM-1A特性
形態(tài)特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 STR檢測發(fā)現(xiàn)該細胞與人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞MuM-2C為同一遺傳背景,懷疑存在交叉污染。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;20mM Hepes
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P18
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:12;D16S539:9;D18S51:13,18;D19S433:14,15;D21S11:30;D2S1338:19;D3S1358:14,16;D5S818:11,12;D7S820:8,10;D8S1179:13;FGA:21;TH01:6,7;TPOX:8,11;vWA:18;
同工酶
染色體
使用權限 A類
產品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Metabotropic glutamate receptor 2 英文名稱: 促代謝型*受體2抗體 ?0.1ml
MGLUR3 英文名稱: 代謝型*受體-3抗體 ?0.2ml
CXCL2 英文名稱: 巨噬細胞炎癥蛋白2( GROβ)抗體 ?0.1ml
Metallothionein 英文名稱: 金屬硫蛋白抗體 ?0.1ml
Phospho-MAP2(Ser136) 英文名稱: 磷酸化微管相關蛋白2抗體 ?0.1ml
MMRN1 英文名稱: 內皮細胞MMRN1蛋白抗體 ?0.2ml
Phospho-MEK1/2 (Ser218 + Ser222) 英文名稱: 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體 ?0.1ml
Phospho-Met (c-Met) (Tyr1003) 英文名稱: 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)抗體 ?0.1ml
Phospho-Met (Tyr1234 + Tyr1235) 英文名稱: 磷酸化肝細胞生長因子受體(原癌基因)抗體 ?0.1ml
Phospho-Mcl1 (Ser159 + Thr163) 英文名稱: 磷酸化髓樣細胞白血病-1抗體 ?0.1ml
Phospho-MDM2 (Ser166) 英文名稱: 磷酸化雙微體2癌基因抗體 ?0.1mlAnti-SMMHC/MYH11/FITC 熒光素標記平滑肌肌球蛋白重鏈抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-SM-MHC/FITC 熒光素標記心肌肌凝蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CMKLR1/CHEMR23/FITC 熒光素標記趨化樣因子受體1抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-C-Myc/MYC/MTLC /FITC 熒光素標記C-Myc致癌基因抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-c-Myc tag/FITC 熒光素標記c-Myc tag標簽抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-c-Myc tag/HRP 辣根過氧化物酶標記c-Myc tag標簽抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CNGA2/FITC 熒光素標記抗環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CNP/CNPase /FITC 熒光素標記C型鈉尿肽抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CNR-1/FITC 熒光素標記鈣粘蛋白相關的神經受體1抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CNR-2/FITC 熒光素標記鈣粘蛋白相關的神經受體2抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
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