本公司專(zhuān)業(yè)代理ATCC細(xì)胞,提供售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì) 犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild的說(shuō)明書(shū)或價(jià)格信息,請(qǐng)咨詢(xún)?cè)诰€客服。
細(xì)胞名稱(chēng) 犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系源自一只雌性英國(guó)可卡犬的腎臟組織,由S.H. Madin and N.B. Darby于1958年建立。該細(xì)胞為角蛋白陽(yáng)性細(xì)胞。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
細(xì)胞種類(lèi)
凍存
對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行凍存的方法是將細(xì)胞置于含有(DMSO)等冷凍保護(hù)劑的*培養(yǎng)基中于液氮中儲(chǔ)存。冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險(xiǎn) (冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。
注:DMSO 可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí),應(yīng)采用與此類(lèi)物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類(lèi)試劑。
細(xì)胞凍存指導(dǎo)原則
凍存細(xì)胞系以備將來(lái)之用時(shí),必須遵守以下原則。與其他細(xì)胞培養(yǎng)操作一樣,我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說(shuō)明,以便獲得結(jié)果。
1)在高細(xì)胞濃度情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,并且細(xì)胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請(qǐng)注意凍存條件取決于所用細(xì)胞系。
2)細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑
4)將冷凍的細(xì)胞于 -70°C 以下溫度儲(chǔ)存;溫度高于 -50°C 時(shí),冷凍的細(xì)胞將開(kāi)始變質(zhì)。
5)必須使用無(wú)菌凍存管儲(chǔ)存冷凍的細(xì)胞。裝有冷凍細(xì)胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存
6)必須穿戴個(gè)人防護(hù)設(shè)備。
7)所有與細(xì)胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無(wú)菌狀態(tài)。必須采用正確的無(wú)菌技術(shù),并且在層流通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。
凍存培養(yǎng)基
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
美托洛爾相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
56718-76-4 美托洛爾相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
29122-7 30mg
434-22-0 諾龍標(biāo)準(zhǔn)品 Nandrolone CIII 50mg
360-70-3 癸酸諾龍標(biāo)準(zhǔn)品 Nandrolone Decanoate CIII 250mg
62-90-8 苯丙酸諾龍標(biāo)準(zhǔn)品 Nandrolone Phenpropionate CIII 250mg
550-99-2 鹽酸萘甲唑啉標(biāo)準(zhǔn)品 Naphazoline Hydrochloride 200mg
91-20-3 萘標(biāo)準(zhǔn)品 Naphthalene 200mg
22204-53-1 萘普生標(biāo)準(zhǔn)品 Naproxen 200mg
26159-34-2 萘普生鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Naproxen Sodium 200mg
55134-13-9 甲基鹽霉素標(biāo)準(zhǔn)品 Narasin 125mg
143388-64-1 鹽酸那拉曲坦標(biāo)準(zhǔn)品 Naratriptan Hydrochloride 125mg
7681-93-8 納他霉素標(biāo)準(zhǔn)品 Natamycin 200mg
105816-04-4 那格列奈標(biāo)準(zhǔn)品 Nateglinide 200mg
7077-5-6 那格列奈相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Nateglinide Related Compound A 10mg
105816-05-5 那格列奈相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
105816-06-6 那格列奈相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 5mg
近紅外系統(tǒng)適用性參考標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品 Near IR System Suitability ea
82752-99-6 萘法唑酮鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Nefazodone Hydrochloride 200mg
57059-62-8 萘法唑酮相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Nefazodone Related Compound A 25mg
萘法唑酮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Nefazodone Related Compound B 25mg
甲磺酸奈非那韋標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
新橙皮甙二氫查爾酮標(biāo)準(zhǔn)品 ea
114-80-7 溴化新斯的明標(biāo)準(zhǔn)品 Neostigmine Bromide 200mg
165450-17-9 紐甜標(biāo)準(zhǔn)品 Neotame 200mg
MTX(Human methotrexate) ELISA Kit 人甲喋呤
PABA(Human para-aminobenzoic acid) ELISA Kit 人對(duì)氨基苯甲酸
LPA(Human L-phenylalanine) ELISA Kit 人苯丙氨酸
Irna(Human Immune RNA) ELISA Kit 人免疫核糖核酸
Beta-Nph(Human Beta-naphthol) ELISA Kit 人β萘酚
BLI(Human Beta-Lactamase inhibitors) ELISA Kit 人β內(nèi)酰胺酶抑制劑
Gal(Human Alpha-galactoyl) ELISA Kit 人α半乳糖基抗體
AlphaNAG (Human AlphaN-acetylglucosaminidase) ELISA Kit 人αN已酰氨基葡糖苷酶
Alpha2-PI (Human Alpha2-plasmin inhititor) ELISA Kit 人α2纖溶酶抑制物
人高香草酸(HVA) ELISA Kit 人高香草酸
人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH) ELISA Kit 人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸
CNR-1(Human cadherln-related neuronal receptor1) ELISA Kit 人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1
ATM(Human Ataxia telangiectasia mutated) ELISA Kit 人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因
AhR(Human aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit 人芳香烴受體
SMAF(Human Specifie Macrophage Arming Paetot) ELISA Kit 人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子
MF/MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit 人促有絲分裂因子
犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wildATF-1(Human activating transcription factor-1) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1
HAMA(Human antimous antibody) ELISA 人抗鼠抗體
VGCC(Human voltage-gated calcium channel) ELISA Kit 人鈣離子通道抗體
BrdU(Human Bromodeoxyuridine)