細(xì)胞名稱 狗腎細(xì)胞；Super Tube

形態(tài)特性 上皮細(xì)胞

生長特性 貼壁生長

特征特性 從表觀正常的成年雌性可卡犬中建立了細(xì)胞株MDCK (ATCC CCL-34)，從中克隆建立了狗上皮樣細(xì)胞株Super Tube。 當(dāng)維持高細(xì)胞濃度時，Super tube形成大量的小管(據(jù)報道，24孔板的每孔鋪7x105細(xì)胞，３天內(nèi)就能形成小管)。 要形成小管，細(xì)胞需要每天兩次換液以提供足夠養(yǎng)分。 與原始細(xì)胞株相比，Super Tube的c-AMP的檢測水平低得多，在forskolin刺激下讀出的腺苷環(huán)化酶水平也低；它的跨上皮抗性也比Super Dome (ATCC CRL- 2286) 和

培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況 PN5

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測 陰性

STR

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)，還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

紐甜相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Neotame Related Compound A 15mg

129618-40-2 無水奈韋拉平標(biāo)準(zhǔn)品 Nevirapine Anhydrous 100mg

129618-40-2 半水奈韋拉平標(biāo)準(zhǔn)品 Nevirapine Hemihydrate 100mg

133627-17-5 奈韋拉平相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg

287980-84-1 奈韋拉平相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 15mg

98-92-0 煙酰胺標(biāo)準(zhǔn)品 Niacinamide (Vitamin B3) 500mg

6019-6-3 二水合重酒石酸尼古丁標(biāo)準(zhǔn)品 Nicotine Bitartrate Dihydrate 500mg

21829-25-4 硝苯地平標(biāo)準(zhǔn)品 Nifedipine 125mg

67035-22-7 硝苯地平硝苯吡啶同系物標(biāo)準(zhǔn)品 25mg

50428-14-3 硝苯地平亞硝基苯吡啶同系物標(biāo)準(zhǔn)品 25mg

66085-59-4 尼莫地平標(biāo)準(zhǔn)品 Nimodipine 125mg

70172-96-2 尼莫地平相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

85677-93-6 尼莫地平相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg

139-13-9 氨基三乙酸標(biāo)準(zhǔn)品 Nitrilotriacetic Acid 50mg

55981-09-4 硝唑尼特標(biāo)準(zhǔn)品 Nitazoxanide 200mg

121-66-4 硝唑尼特相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg

67-20-9 呋喃妥英標(biāo)準(zhǔn)品 Nitrofurantoin 500mg

59-87-0 呋喃西林標(biāo)準(zhǔn)品 Nitrofurazone 200mg

92-55-7 5-硝基糠醛二乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)品

ELISA Kit  人溴脫氧核苷尿嘧啶

FSP(Human Fibroblast surface protein) ELISA Kit  人纖維母細(xì)胞表面抗原

SLPI(Human secretory leukocyte protease inhibitor) ELISA Kit  人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子

POMC(Human pro-opiomelanocortin) ELISA Kit  人阿黑皮素原

ADMA(Human asymmetrical dimethylarginine) ELISA Kit  人不對稱二甲基精氨酸

ST(Human Serotonin) ELISA Kit  人血清素/血清胺

CTX(Human cytotoxin) ELISA Kit  人細(xì)胞毒素

Alpha-SYN(Human Alpha-Synuclein) ELISA Kit  人α突觸核蛋白

CA19-9(Human Carbohydrate antigen19-9) ELISA Kit  人糖鏈抗原19-9

HRD(Human Hirudin) ELISA Kit  人水蛭素

Human Tacrolimus-FK506 ELISA Kit  人他克莫司

ESA(Human epithelial specific antigen) ELISA Kit  人上皮特異性抗原

EMA(Human Epithelial membrane antigen) ELISA Kit  人上皮膜抗原

CLU(Human clusterin) ELISA Kit  人凝聚素

OJ/IleRS(Human anti-OJ-antibody) ELISA Kit  人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體

ACA/CENP(Human Anticentromere Antibody) ELISA Kit  人抗著絲點(diǎn)抗體

MYOG(Human myogenin) ELISA Kit  人肌細(xì)胞生成素

ASP(Human antibody to group A streptococcal polysaccharide) ELISA Kit  人A組鏈球菌菌壁多糖抗體

APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit  人活化蛋白C抵抗素

Ext-N(Human N-terminal extein) ELISA Kit  人N端外顯肽

狗腎細(xì)胞；Super TubeC(Human secretory component) ELISA Kit  人分泌成分

ADP(Human Adenosine diphosphate) ELISA Kit  人二磷酸腺苷

PG(Human Proteoglycan) ELISA Kit  人蛋白聚糖

PYD(Human Pyridinoline) ELISA Ki

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。