細(xì)胞名稱 犬腎細(xì)胞；MDCK(NBL-2)

形態(tài)特性 上皮樣；多角

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 1958年，Madin SH和Darby NB從表觀正常的成年雌性科克獵犬的腎建立了MDCK細(xì)胞株。角蛋白陽性。該細(xì)胞曾被用于研究β淀粉前體蛋白的形成及其蛋白水解產(chǎn)物的分類。

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS

傳代方法 1:2~1:6傳代；2~3天換液1次。

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）

STR -

同工酶

染色體 76~80

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)，還用于藥品中梭菌的檢測(cè)。(《中華人民共和國(guó)藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測(cè)試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

準(zhǔn)品 50mg

奧芬那君相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 20mg

10488-36-5 奧芬那君相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 20mg

204255-11-8 磷酸奧斯他韋標(biāo)準(zhǔn)品 Oseltamivir Phosphate 200mg

奧塞米韋相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Oseltamivir Related Compound A 10mg

7240-38-2 苯唑西林鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Oxacillin Sodium 200mg

61825-94-3 奧沙利鉑對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品 Oxaliplatin 125mg

6153-56-6 奧沙利鉑相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 100mg

66900-68-3 奧沙利鉑相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 15mg

奧沙利鉑相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 20mg

61758-77-8 奧沙利鉑相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 10mg

66845-32-7 奧沙利鉑相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品 25mg

61848-66-6 奧沙利鉑標(biāo)準(zhǔn)品(系統(tǒng)使用性用) 25mg

53-39-4 氧雄龍標(biāo)準(zhǔn)品 Oxandrolone CIII 50mg

氧雄龍相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg

4424-45-7 氧雄龍相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 20mg

氧雄龍相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 20mg

21256-18-8 奧沙普秦標(biāo)準(zhǔn)

esponse) ELISA Kit  人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白

HNP1-3(Human neutrophil peptide 1-3) ELISA Kit  人中性粒細(xì)胞防御素1-3

ECP(Human eosinophil cationic protein) ELISA Kit  人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白

PS(Human plasma anticoagulant protein S) ELISA Kit  人血漿抗凝蛋白S

PC(Human plasma anticoagulant protein C) ELISA Kit  人血漿抗凝蛋白C

Fc Gamma(Human Fc region of immunoglobulin G) ELISA Kit  人免疫球蛋白G Fc片段

CyPB(Human cyclophilin B) ELISA Kit  人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B

C4BP(Human C4 binding protein) ELISA Kit  人C4結(jié)合蛋白

C3c(Human Complement fragment 3c) ELISA Kit  人補(bǔ)體片段3c

C7(Human Complement fragment 3c0 ELISA Kit  人補(bǔ)體7

A Beta1-42(Human amyloid beta peptide 1-42) ELISA Kit  人β淀粉樣蛋白1-42

Human chemerin ELISA Kit   人chemerin

F XII (Human coagulation factor XII ) ELISA Kit  人凝血因子Ⅻ

F X III (Human coagulation factor X III ) ELISA Kit  人凝血因子ⅩⅢ

犬腎細(xì)胞；MDCK(NBL-2)F III (Human coagulation factor III 0 ELISA Kit  人凝血因子Ⅲ

C1q(Human Complement 1q) ELISA Kit  人補(bǔ)體1q

GP- IV (Human platelet membrane glycoprotein IV ) ELISA Kit  人血小板膜糖蛋白Ⅳ

Human Thymosin Alpha1 ELI

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營(yíng)養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí)，30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。