游離膽固醇（FC）檢測試劑盒測定意義：

FC 氧化酶催化 FC 生成△4-膽甾烯酮和 H2O2，過氧化物酶催化 H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物，在 500nm 有吸收峰，其顏色深淺與 FC 含量成正比。
自備實驗用品及儀器：
水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、和蒸餾水。
試劑組成和配置：
試劑一：異丙醇 100mL（自備）；
工作液：液體 20mL×1 瓶，4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：液體 1mL×1 支，濃度為 0.5 μ mol/mL，4℃避光保存。
FC 的提?。?br />1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心 10min，取上清置冰上待測。
2. 細(xì)菌、真菌：先收集 400-500 萬細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，加 1mL 試劑一，超聲波破碎 1min（強(qiáng)度20％，超聲 2s，停 1s），即 FC 待測液。
3. 血清（漿）樣品：直接測定。
游離膽固醇（FC）檢測試劑盒測定操作：
1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min，調(diào)節(jié)波長到 500 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. FC 工作液在 40℃水浴中預(yù)熱 30min。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管：依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 50μ L FC 標(biāo)準(zhǔn)液和 150μ L FC 工作液，混勻，靜置24h 后于 500nm 測定 A 標(biāo)準(zhǔn)管。
4. 測定管：依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 50μ L FC 待測液和 150μ L FC 工作液，混勻，靜置24h 后于 500nm 測定 A 測定管。
游離膽固醇（FC）檢測試劑盒計算公式：
1. 血清（漿）中 FC 含量計算：
FC 含量（μ mol /dL）= C 標(biāo)準(zhǔn)液×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管×100mL
=50×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管 C 標(biāo)準(zhǔn)液：0.5μ mol/mL；100 mL：1dL=100 mL。
2. 組織中 FC 含量計算： (1)按樣本蛋白濃度計算
FC 含量（μ mol / mg prot）= C 標(biāo)準(zhǔn)液×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管÷Cpr
= 0.5×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算
FC 含量（μ mol / g 鮮重）= C 標(biāo)準(zhǔn)液×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管÷W
= 0.5×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管÷W
C 標(biāo)準(zhǔn)液：0.5μ mol/mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g/mL
3. 細(xì)胞、細(xì)菌中 FC 含量計算：
FC 含量（μ mol /104 cell）= C 標(biāo)準(zhǔn)液×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管÷細(xì)菌或細(xì)胞（104 cell /L）
=0.5×A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管÷細(xì)菌或細(xì)胞（104 cell /L） C 標(biāo)準(zhǔn)液：0.5μ mol/mL。
游離膽固醇（FC）檢測試劑盒檢出限為 1nmol/mL