AF488標(biāo)記β-谷甾醇，AF488-β-Sitosterol的合成步驟概述

2025年06月25日 17:26西安齊岳生物科技有限公司點(diǎn)擊量：1

AF488-β-Sitosterol（AF488標(biāo)記β-谷甾醇）是將綠色熒光染料 Alexa Fluor® 488 共價(jià)連接至植物固醇 β-谷甾醇（β-Sitosterol）分子上的熒光探針。該標(biāo)記物結(jié)合了β-谷甾醇的生物膜親和性與 AF488 的明亮熒光特性，廣泛應(yīng)用于研究植物甾醇在細(xì)胞膜中的分布、攝取動(dòng)力學(xué)、膜結(jié)構(gòu)模擬以及甾醇代謝機(jī)制。

一、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

β-谷甾醇結(jié)構(gòu)：是一種天然植物固醇，結(jié)構(gòu)類似，含有疏水性的四環(huán)甾體骨架和一個(gè) C-3 位的羥基，是的可供修飾的反應(yīng)位點(diǎn)。

AF488特性：Alexa Fluor 488 是高量子產(chǎn)率的綠色熒光染料，其 NHS 酯形式專為與伯胺反應(yīng)設(shè)計(jì)，常用于偶聯(lián)生物大分子。

由于 β-谷甾醇僅含有羥基而無胺基，因此需對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)衍生化，引入可供 NHS 酯反應(yīng)的氨基功能團(tuán)。

二、合成步驟概述

β-谷甾醇氨基化改造

首先在 β-谷甾醇的 C-3 羥基位引入碳鏈橋接的氨基官能團(tuán)，如通過碳酸酯、酯或醚鍵接入含胺基的連接臂；

得到具有伯胺的 β-谷甾醇衍生物（β-Sitosterol-NH?），作為偶聯(lián)活性基。

AF488-NHS 酯偶聯(lián)

將 AF488-NHS 酯溶于干燥 DMSO 或碳酸鹽緩沖液中（pH 8.3）；

加入 β-Sitosterol-NH? 溶液，在避光條件下攪拌 4~12 小時(shí)；

NHS 酯與胺基反應(yīng)，生成穩(wěn)定的酰胺鍵；

反應(yīng)結(jié)束后加入純水稀釋并進(jìn)行提純。

純化與表征

使用反相 HPLC 分離標(biāo)記產(chǎn)物；

熒光檢測(cè)（Ex 488 nm，Em 519 nm）確認(rèn)產(chǎn)物；

質(zhì)譜（MS）與核磁（NMR）分析可用于結(jié)構(gòu)驗(yàn)證；

凍干或溶于DMSO儲(chǔ)存，避光、防潮保存。

產(chǎn)品名稱：AF488標(biāo)記β-谷甾醇 AF488-β-Sitosterol

純度：95%+

性狀：基于不同的分子量，呈白色 / 類白色固體，或液體。

溶劑：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規(guī)有機(jī)溶劑。

儲(chǔ)藏條件：-20°C干燥避光保存

包裝規(guī)格：50mg 100mg 250mg 500mg（按需提供）

齊岳生物供應(yīng)各種熒光染料，包括CY系列、FITC、Rhodamine、Bodipy系列染料、Coumairn 染料、Dansyl染料、FAM/5-TAMRA、NBD、ICG及IR系列、ATTO系列染料、AMCA、Perylene、碘化物、DIR/DIL/DIO/DID/DAPI細(xì)胞膜染料等等，提供各種熒光（CY系列、FITC、羅丹明等）熒光染料標(biāo)記的定制服務(wù)

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僅供科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)AXC.2025.06.23

關(guān)鍵詞：PLC

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