產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
GAPDH3磷酸甘油醛脫氫酶檢測試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | FS-01S63495 |
商品介紹:
測定意義
GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶,與糖異生途徑、體內(nèi)血糖濃度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關(guān),在機(jī)體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發(fā)揮重要作用。
測定原理
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、無機(jī)磷和NAD,340nm處測定NADH的減少量可反映GADPH活性的高低。
需自備的儀器和用品
分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產(chǎn)品內(nèi)容:
公司產(chǎn)品僅用于科研酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時(shí)加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時(shí)加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
NADH 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提?。悍Q取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提?。悍Q取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
3、細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提?。菏占?500 萬細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提?。菏占?500 萬細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
雞脂蛋白a(LP-a)試劑盒Anti-CNP Antibody流感病A抗原
雞凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95/TNFRSF6)試劑盒 Anti-CNP Antibody透明質(zhì)/玻璃抗原
雞抑瘤M(OSM)試劑盒Anti-CNOT7(CAF1) pAbHA tag標(biāo)簽多肽
雞血漿抗凝蛋白S(PS)試劑盒 Anti-CNR2 AntibodyHA tag標(biāo)簽(分支多肽)
雞蘇酰tRNA合成(TARS)試劑盒 Anti-CNTN2 Antibody肝生長因子激活物抑制因子抗原
雞轉(zhuǎn)錄激活因子-3(ATF-3)試劑盒 Anti-CNTN2 Antibody類血紅蛋白α1抗原
雞Bκ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)試劑盒 Anti-CNTFR Antibody乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原
雞補(bǔ)體因子8g(C8g)試劑盒 Anti-CNTN5 Antibody乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原
雞血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/KDR)試劑盒Anti-CNTD2 Antibody肝炎病X蛋白(HBxAg)C端抗原
雞血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)試劑盒 Anti-CNTN6 Antibodyα亞基絨毛膜促性腺多肽抗原
雞球蛋白G Fc片段(Fcγ)試劑盒 Anti-COL11A1 Antibody膀胱腫瘤抗原
雞胸腺依賴性抗原(TD-Ag)試劑盒Anti-COL13A1 Antibodyc-erbB-2受體抗體(N端)
雞絨毛膜促性腺α肽(CGα)試劑盒Anti-CNTROB Antibodyc-erbB-2受體抗原(N端)
雞角膜蛋白(KERA)試劑盒Anti-COL14A1 Antibody肝生長因子抗原
雞凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)試劑盒 Anti-COL16A1 Antibody類皰疹病8抗原
GAPDH3磷酸甘油醛脫氫酶檢測試劑盒微量法乙-1-萘酯 99%2-巰基吡-1-氧化鈉鹽 40%水溶液P63 protein P63 腫瘤抑制基因(抗原)
草酰二肼 97%角鯊?fù)?99%OPG(Osteoprotegerin) 護(hù)骨(多肽抗原)
4-磺吡鎓 98%N-乙基-2-甲基吡咯烷 98%OPGL (Osteoprotegerin ligand) 骨保護(hù)蛋白配體(抗原)
1,3-二甲基-2-咪唑啉酮 98%1-(2-二甲基基乙基)-1H-5-巰基-四氮唑 98%P311 protein 增生性瘢痕相關(guān)蛋白(抗原)
1,3-二甲基-2-咪唑啉酮 用于GC-HS, ≥99.8% (GC)1-乙基-2-吡咯烷酮 99%PARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二磷多聚抗原
間甲 98%5-甲基四唑 98%Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(人:N端多肽)、內(nèi)臟脂肪、 又稱:前B克隆增強(qiáng)因子、內(nèi)肥、腹脂
扁桃苷 97%2-甲氧基-5-磺酰甲甲酯 98%Visfatin-1 (PBEF1)(NT) hu、 mo、 rat、MK 內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(人、大、小鼠、猴同源:N端多肽)、內(nèi)臟脂肪、前B克隆增強(qiáng)因子、內(nèi)肥、腹脂
氧化苦參 98%疊氮鈉 AR,99%(劇品)Visfatin-2(CT)hu、mo、rat、MK 內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(抗人、大、小鼠、猴:N端多肽)前B克隆增強(qiáng)因子、內(nèi)肥、腹脂
注意事項(xiàng):
1、操作過程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應(yīng)過程要注意避光。
3、當(dāng)吸光值大于 1 時(shí),建議稀釋后測量,計(jì)算公式中應(yīng)當(dāng)乘以稀釋倍數(shù)。