商品介紹:
測定意義
果糖1,6-二磷酸是機(jī)體內(nèi)的高能代謝物和代謝調(diào)控劑,是糖酵解途徑的重要中間體,廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi),能影響細(xì)胞內(nèi)鉀離子的濃度,改善葡萄糖和其他能量底物的代謝,促進(jìn)組織氧的釋放,廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)藥制劑。
測定原理
醛縮酶催化果糖1,6-二磷酸降解,產(chǎn)物與DNPH縮合成紫紅色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、研缽、恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)、微量石英比色皿。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
FDP果糖1,6二磷酸檢測試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | FS-01S63497 |
產(chǎn)品內(nèi)容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時(shí)加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時(shí)加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
NADH 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提?。悍Q取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
3、細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提?。菏占?500 萬細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:收集 500 萬細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
注意事項(xiàng):
1、公司產(chǎn)品僅用于科研操作過程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應(yīng)過程要注意避光。
3、當(dāng)吸光值大于 1 時(shí),建議稀釋后測量,計(jì)算公式中應(yīng)當(dāng)乘以稀釋倍數(shù)。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
猴二氫硫辛脫氫(DLD)試劑盒Human NUP50 ELISA Kit肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體
猴氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒Human NUP205 ELISA Kit磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪激抗體
猴異常凝血原(APT)試劑盒 Human NUDT6 ELISA Kit絲裂原活化蛋白激13抗體
猴中心體蛋白110(CEP110)試劑盒Human NUP53 ELISA Kit多纖毛蛋白抗體
猴鐵調(diào)(Hepc)試劑盒Human NUMBL ELISA Kit肌管相關(guān)蛋白8抗體
猴α-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)試劑盒 Human PYGB(Glycogen phosphorylase, brain form) ELISA Kit巨噬甘露糖受體2抗體
猴胰島降解(IDE)試劑盒Human NUDT8 ELISA Kit周期G1的相互作用蛋白抗體
猴TATA框結(jié)合蛋白/TBP相關(guān)因子(TAF)試劑盒Human NUP107 ELISA Kit主導(dǎo)控制樣蛋白3抗體
猴谷半胱連接修飾亞基(GCLM)試劑盒Human NUP133 ELISA Kit絲裂原活化蛋白激MKK3抗體
猴血紅蛋白β(HBβ)試劑盒 Human NUP160 ELISA KitMYSM1抗體
猴抗糖脂抗體(AGA)試劑盒 Human F11(Coagulation factor XI) ELISA Kit單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體
猴蕈型膽受體M2(CHRM2)試劑盒Human NUP153 ELISA Kit微管相關(guān)蛋白1A抗體
猴基質(zhì)金屬蛋白原10 (Pro-MMP-10)試劑盒Human NUP50 ELISA Kit中期因子/肝結(jié)合生長因子抗體
猴β肌動(dòng)蛋白(β-actin)試劑盒 Human NUP205 ELISA Kit鹽皮質(zhì)受體抗體
猴生長分化因子3(GDF3)試劑盒Human NUDT6 ELISA Kit促黑α抗體
FDP果糖1,6二磷酸檢測試劑盒微量法乙基香蘭 98%氯化鐠 99.99% metals basisAnti-Phospho-MARCKS (Ser152/156) /FITC 熒光標(biāo)記磷化蛋白激C底物Marcks抗體IgG
糠酰氯 97%氯化鐠 99.9% metals basisAnti-Phospho-MARCKS (Ser162) /FITC 熒光標(biāo)記磷化蛋白激C底物Marcks抗體IgG
對羥基甲 AR,98%氧化鐠(III) 99.9% metals basisAnti-MAPKK1 /FITC 熒光標(biāo)記絲裂原活化蛋白激激1抗體IgG
基磺 80%氟化鐠(III) 無水,粉末,99.99% metals basisAnti-MAPKK2 /FITC 熒光標(biāo)記絲裂原活化蛋白激激2抗體IgG
?;?/span> 99%硝銣 99.0% metals basisAnti-SEK1/MKK4/FITC 熒光標(biāo)記絲裂原活化蛋白激激4抗體IgG
?;?/span> USP級(jí),已通過培養(yǎng)測試硝銣 99.9% metals basisAnti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser80)/FITC 熒光標(biāo)記磷化絲裂原活化蛋白激激4抗體IgG
香草 AR,99%氯化銣 SPAnti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257) /FITC 熒光標(biāo)記磷化絲裂原活化蛋白激激4抗體IgG
2-基并咪唑 97%氯化銣 99.95% metals basisAnti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261)/FITC 熒光標(biāo)記磷化絲裂原活化蛋白激激4抗體IgG