商品介紹:
測(cè)定意義
蘋果酸合酶(MS,EC 4.1.3.2)是屬于轉(zhuǎn)移酶中?;D(zhuǎn)移酶的一類,主要存在于植物和微生物中。MS是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,在MS催化下乙醛酸與乙酰輔酶反應(yīng)生成蘋果酸。
測(cè)定原理:
MS催化乙酰CoA和乙醛酸產(chǎn)生蘋果酸,同時(shí)生成輔酶,輔酶使無色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。
需自備的儀器和用品:
酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰、和蒸餾水
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
MS蘋果酸合酶檢測(cè)試劑盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | FS-01S63485 |
產(chǎn)品內(nèi)容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時(shí)加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時(shí)加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
NADH 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提?。?/span>
NAD+的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提?。喝?0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提?。悍Q取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提?。悍Q取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
3、細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提?。菏占?500 萬細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提取:收集 500 萬細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、公司產(chǎn)品僅用于科研操作過程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應(yīng)過程要注意避光。
3、當(dāng)吸光值大于 1 時(shí),建議稀釋后測(cè)量,計(jì)算公式中應(yīng)當(dāng)乘以稀釋倍數(shù)。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
豚鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)聯(lián)免疫試劑盒膜醭畢赤酵母Human MUC17 (Mucin 17) ELISA Kit
豚鼠表皮角蛋白(EK)聯(lián)免疫試劑盒 嗜冷桿*Human MUC2 (Mucin 2) ELISA Kit
豚鼠高分子量角蛋白(CK-HMW)聯(lián)免疫試劑盒 白色短波單胞Human MUC20 (Mucin 20) ELISA Kit
豚鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(NRG-3)聯(lián)免疫試劑盒假單胞Human CNR1 (Cannabinoid Receptor 1, Brain) ELISA Kit
豚鼠半胱天冬3(CASP3)聯(lián)免疫試劑盒蠟樣芽孢桿Human CAP1 (Adenylate Cyclase Associated Protein 1) ELISA Kit
豚鼠紅藻離子型谷受體2(GRIK2)聯(lián)免疫試劑盒 擬莖點(diǎn)霉Human CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit
豚鼠小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)聯(lián)免疫試劑盒白僵Human CA19-9 (Carbohydrate antigen19-9) ELISA Kit
豚鼠基質(zhì)衍生因子4(SDF-4)聯(lián)免疫試劑盒褐孢大禿馬勃Human CDT (Carbohydrate Deficient Transferrin) ELISA Kit
豚鼠抗核膜糖蛋白210抗體(AGPA)聯(lián)免疫試劑盒 多根硬皮馬勃Human CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit
豚鼠外信號(hào)調(diào)節(jié)激(ERK)聯(lián)免疫試劑盒 大腸埃希氏桿Human CA2 (Carbonic Anhydrase II) ELISA Kit
豚鼠色b-561(CYB561)聯(lián)免疫試劑盒 側(cè)耳Human HbCO (Carboxyhemoglobin) ELISA Kit
豚鼠蛋白磷(PP)聯(lián)免疫試劑盒孔球孢霉Human CEA (Carcinoembryonic Antigen) ELISA Kit
豚鼠干擾誘導(dǎo)Tα亞族趨化因子 (I-TAC)聯(lián)免疫試劑盒熱帶根瘤Human ANKRD1 (Ankyrin Repeat Domain 1) ELISA Kit
豚鼠球蛋白A1 (IgA1)聯(lián)免疫試劑盒重金屬鉛速測(cè)試劑包Human cTT/TNNT2 (Troponin T Type 2, Cardiac) ELISA Kit
豚鼠腫瘤壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)聯(lián)免疫試劑盒粗皮馬勃Human CMLC-1 (Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit
MS蘋果酸合酶檢測(cè)試劑盒微量法乙鎘 二水合物 CP2.4-D丁酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=3%LN(Mouse Laminin) ELISA Kit 小鼠層連蛋白/板層
氯化銅,二水 CP2.5-D丁酯標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=6%,溶劑:正己烷M-CSF(Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA Kit 小鼠巨噬集落激因子
氯化銅,二水 AR1,1-二氯乙烷標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.96mg/ml,基體:甲MDC/CCL22(Mouse Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit 小鼠巨噬來源的趨化因子
氯化銅,二水 ACS反式-1,2-二氯乙烯標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.87mg/ml,基體:甲R(shí)ANTES/CCL5(Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA Kit 小鼠正常T表達(dá)和分泌因子
氯化銅,二水 99.99% metals basis二標(biāo)準(zhǔn)溶液 499mg/L,基體:甲叔丁MIP-2(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 2) ELISA Kit 小鼠巨噬炎性蛋白2
氯化銅,二水 99.999% metals basis鄰二甲二甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 230.0μg/mL,溶劑:甲OT(Mouse oxytocin) ELISA Kit 小鼠催產(chǎn)
硝銅,三水 AR,99%鄰二甲二乙酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 238.0μg/mL,溶劑:甲MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Mouse macrophage inflammatory protein 3 Beta) ELISA Kit 小鼠巨噬炎性蛋白3β
硝銅,三水 CP,98%鄰二甲二正丁酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 195.0μg/mL,溶劑:甲NTX(Mouse cross linked N-opeptide of type I collagen) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原N末端肽