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【肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.】分離技巧_注意事項(xiàng)_性能優(yōu)點(diǎn)_參數(shù)說(shuō)明

時(shí)間:2018/3/23閱讀:1622
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【肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.參數(shù)說(shuō)明】

中文名:肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.

英文名:Heparin Sepharose H.P.

供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格:100ml、500ml

保存溫度:4-8℃

操作溫度:4-40℃

分離范圍:70,000-40 ×106

凝膠類型:凝膠過(guò)濾填料,凝膠層析介質(zhì)

應(yīng)用:蛋白、大分子復(fù)合物、病毒、核酸、多糖的分離、分子量測(cè)定。

【肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.】分離技巧_注意事項(xiàng)_性能優(yōu)點(diǎn)_參數(shù)說(shuō)明

【肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.】分離技巧_注意事項(xiàng)_性能優(yōu)點(diǎn)_參數(shù)說(shuō)明

 

肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.性能優(yōu)點(diǎn)】

1、傳統(tǒng)的偶聯(lián)瓊脂糖介質(zhì),非特異性吸附低,回收率高。

2、分離范圍廣泛。

3、適合分離分子量大小差異大,而對(duì)分辨率要求不高的樣本。

 

肝素-瓊脂糖凝膠H.P.分離技巧】

1、分離時(shí)流速不可太快,切切不可心急,所謂欲速則不達(dá);接餾分時(shí)可開(kāi)全速,節(jié)省時(shí)間。

2、柱子盡可能長(zhǎng),瓊脂糖凝膠柱長(zhǎng)的增加將極大地改善分離,所不要吝惜填料,寧可將填料全裝在一根大柱子中,不要將填料裝成幾根小柱。所謂集中優(yōu)勢(shì)兵力,打擊敵人。

3、 餾分一定要接的細(xì),可1/10,或1/20 個(gè)保留體積接成一餾分。

4、洗脫體積一般為2-3個(gè)保留體積,對(duì)特殊保留強(qiáng)的化合物,可洗脫5個(gè)保留體積。

5、鞣質(zhì)成分死吸附嚴(yán)重,如不在乎填料者,可用Sephadex LH20 分鞣質(zhì)

6、瓊脂糖凝膠對(duì)黃酮類成分的分離效果,方法很成型,有大量文獻(xiàn)參考。

7、填料反復(fù)使用,每次用完,一般可用甲醇將柱子洗干凈,然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來(lái),待用。暫時(shí)不用試可以水洗→含水醇洗(醇的濃度逐步遞增)→醇洗,zui后泡在醇中貯于磨口瓶中備用。如長(zhǎng)期不用時(shí),可在以上處理基礎(chǔ)上,減壓抽干,再用少量乙迷洗凈抽干,室溫充分揮散至無(wú)醚味后,60~80°C干燥后保存。

 

肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.注意事項(xiàng)

1、不同配基的偶聯(lián)方法與上面類似,但是反應(yīng)的條件例如:配基加入量,反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)溫度應(yīng)根據(jù)配基的不同進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整;

2、可用碳酸鹽、硼酸鹽和磷酸鹽緩沖液做為偶聯(lián)緩沖液,但不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸的緩沖液。

3、產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20%乙醇),通風(fēng)、干燥、清潔的地方。

4、不能冷凍。

5、用過(guò)的柱子貯存在4℃(20%乙醇)。

 

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