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【肝素-瓊脂糖凝膠 6FF】參數(shù)說明_使用方法_適用范圍

時(shí)間:2018/3/23閱讀:1904
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【肝素-瓊脂糖凝膠 6FF參數(shù)說明】

中文名:肝素-瓊脂糖凝膠 6FF

英文名:Heparin Sepharose 6FF

供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格:BR

包裝:25ml/瓶、100ml升/瓶、500ml升/瓶

保存溫度:4-8℃

粒徑:45-165 um

配基密度:2 μmol Cibacron Blue /ml

保存條件:4-25℃

應(yīng)用:親和層析介質(zhì),純化干擾素、α2-巨球蛋白、凝血因子、需要核苷酸輔助的酶

【肝素-瓊脂糖凝膠 6FF】參數(shù)_使用方法_適用范圍

【肝素-瓊脂糖凝膠 6FF】參數(shù)_使用方法_適用范圍

 

【肝素-瓊脂糖凝膠 6FF使用方法】

1、乙醇浸泡:在室溫下,將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時(shí),并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干。

2、無鹽水浸泡:室溫下,在無鹽水中充分溶脹24小時(shí),間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹。

3、鹽酸浸泡:在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時(shí),間隙攪拌,濾干,水洗只中性。

4、將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層。

5、上樣前平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。

6、膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱高控制在40-50cm以下,過高的凝膠層會(huì)引起較大的反壓,應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時(shí)高徑比為5:1即可。

7、洗脫方法:可以用無鹽水,也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化。

8、在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個(gè)柱體積,再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。

 

【肝素-瓊脂糖凝膠 6FF適用范圍】

本產(chǎn)品具有高化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、高載量、好的機(jī)械性能、可在位清洗、多次重復(fù)使用等特點(diǎn),非特異性吸附低,回收率高,適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn),適用于在pH工作范圍內(nèi)可形成負(fù)離子的生物大分子的分離純化,廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。

 

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