1.產(chǎn)品名稱:小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞實驗方法
2.組織來源:胎盤組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介:
小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持的激素,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后,在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸,外裹合體滋養(yǎng)層,稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸,使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織,并與胚體內(nèi)的血管相通時,次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育,叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤,而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。
本公司的小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞采用*-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-7免疫熒光鑒定,純度可達(dá)85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM-F12、FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞名稱 | 小鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞實驗方法 |
規(guī)格 | 5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
價格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
優(yōu)勢:
1、細(xì)胞株種類齊全,包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*,專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株,免費復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片,三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片,五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā),超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價,超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,優(yōu)秀的科研隊伍,*的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
熒光素Cy3標(biāo)記人IgM
熒光素Cy3標(biāo)記人IgA
熒光素Cy3標(biāo)記猴IgG
熒光素Cy3標(biāo)記猴IgM
熒光素Cy3標(biāo)記小鼠IgM
熒光素Cy3標(biāo)記豬IgG
熒光素Cy3標(biāo)記水貂IgG
熒光素Cy3標(biāo)記兔IgM
熒光素Cy3標(biāo)記大鼠IgM
熒光素Cy3標(biāo)記*-1受體拮抗劑
熒光素Cy3標(biāo)記血藍(lán)蛋白
熒光素Cy3標(biāo)記雞卵白蛋白
熒光素Cy3標(biāo)記*
熒光素Cy3標(biāo)記胰*
Alexa Fluor 555標(biāo)記羊IgG(細(xì)胞流式同型對照)
Alexa Fluor 555標(biāo)記大鼠IgG(細(xì)胞流式同型對照)
熒光素PE-Cy7標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對照)
辣根過氧化物酶標(biāo)記*
(親和純化) 牛IgG
熒光素標(biāo)記牛血清白蛋白
羅丹明標(biāo)記牛血清白蛋白
羅丹明標(biāo)記狗IgM
熒光素Cy3標(biāo)記狗IgM
熒光素PE標(biāo)記狗IgG
兔抗熒光素
羊IgG
辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗人IgA
熒光素APC標(biāo)記羊IgG(細(xì)胞流式同型對照)
羅丹明標(biāo)記*
(免疫親和純化)人IgM
兔抗HRP
(親和純化) 人IgG
(親和純化) 人分泌型IgA
*化人IgG
熒光素Cy3標(biāo)記豬胰島素蛋白
(免疫親和純化) 小鼠IgG
小鼠IgM (免疫親和純化)
(親和純化) 猴IgM
Alexa Fluor 350標(biāo)記小鼠IgG(細(xì)胞流式同型對照)
Alexa Fluor 555標(biāo)記小鼠IgG(細(xì)胞流式同型對照)
48T
RANTES/CCL5(Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA Kit 小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子 48T
MIP-2(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 2) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2 48T
OT(Mouse oxytocin) ELISA Kit 小鼠催產(chǎn)素 48T
MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Mouse macrophage inflammatory protein 3 Beta) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β 48T
NTX(Mouse cross linked N-opeptide of type I collagen) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原N末端肽 48T
5-NT(Mouse 5-Nucleotidase) ELISA Kit 小鼠5核苷酸酶 48T
CD19(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD19分子 48T
CD3(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD3分子 48T
CD4(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD4分子 48T
CD8(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD8分子 48T
CD25(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD25分子 48T
CD20(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD20分子 48T
CD14(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD14分子 48T
NGF(Mouse Nerve growth factor) ELISA kit 小鼠神經(jīng)生長因子 48T
NT-3(Mouse Neurotrophin 3) ELISA kit 小鼠神經(jīng)生長因子3 48T
NT-4(Mouse Neurotrophin 4) ELISA kit 小鼠神經(jīng)生長因子4 48T
OPG(Mouse Osteoprotegerin) ELISA KIT 小鼠骨保護素 48T
BF(Mouse factor B) ELISA Kit 小鼠B因子