本公司專業(yè)代理ATCC細(xì)胞,提供售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì) 人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38的說明書或價(jià)格信息,請咨詢在線客服。
細(xì)胞名稱 人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 WI-38人二倍體細(xì)胞系來自3個(gè)月的正常胚胎肺組織。 該細(xì)胞系是首株用于人類疫苗制備的人二倍體細(xì)胞系。 培液中添加TNF alpha可以促進(jìn)細(xì)胞生長。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(15+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
細(xì)胞種類
凍存
對培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行凍存的方法是將細(xì)胞置于含有(DMSO)等冷凍保護(hù)劑的*培養(yǎng)基中于液氮中儲(chǔ)存。冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險(xiǎn) (冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。
注:DMSO 可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí),應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。
細(xì)胞凍存指導(dǎo)原則
凍存細(xì)胞系以備將來之用時(shí),必須遵守以下原則。與其他細(xì)胞培養(yǎng)操作一樣,我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說明,以便獲得結(jié)果。
1)在高細(xì)胞濃度情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,并且細(xì)胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細(xì)胞系。
2)細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑
4)將冷凍的細(xì)胞于 -70°C 以下溫度儲(chǔ)存;溫度高于 -50°C 時(shí),冷凍的細(xì)胞將開始變質(zhì)。
5)必須使用無菌凍存管儲(chǔ)存冷凍的細(xì)胞。裝有冷凍細(xì)胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存
6)必須穿戴個(gè)人防護(hù)設(shè)備。
7)所有與細(xì)胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無菌狀態(tài)。必須采用正確的無菌技術(shù),并且在層流通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。
凍存培養(yǎng)基
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
etronidazole/OVA 甲硝唑偶聯(lián)雞卵白蛋白
Metronidazole/KLH 甲硝唑偶聯(lián)牛血藍(lán)蛋白 10mg Metronidazole/KLH 甲硝唑偶聯(lián)牛血藍(lán)蛋白 Metronidazole/KLH 甲硝唑偶聯(lián)牛血藍(lán)蛋白
Metronidazole/BSA 甲硝唑偶聯(lián)牛血清白蛋白 10mg Metronidazole/BSA 甲硝唑偶聯(lián)牛血清白蛋白 Metronidazole/BSA 甲硝唑偶聯(lián)牛血清白蛋白
Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(抗原 0.5mg Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(抗原)
Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原 0.5mg Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原)
Melamine/OVA(ovalbumin 5mg 三聚氰胺與雞卵白蛋白偶聯(lián)物 Melamine/OVA(ovalbumin) 三聚氰胺與雞卵白蛋白偶聯(lián)物
Melamine/OVA 三聚氰胺偶聯(lián)雞卵白蛋白 1mg Melamine/OVA 三聚氰胺偶聯(lián)雞卵白蛋白 Melamine/OVA 三聚氰胺偶聯(lián)雞卵白蛋白
Melamine/KLH 三聚氰胺與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物 1mg Melamine/KLH 三聚氰胺與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物 Melamine/KLH 三聚氰胺與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物
Melamine/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記三聚氰胺 0.5ml Melamine/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記三聚氰胺 Melamine/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記三聚氰胺
Melamine/BSA 三聚氰胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物 1mg Melamine/BSA 三聚氰胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物 Melamine/BSA 三聚氰胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物
Anti-ZCWCC1/FITC 熒光素標(biāo)記ZCWCC1抗體IgG
Anti-Z-DEVD-FMK/FITC 熒光素標(biāo)記CASPASE3凋亡抑制劑IgG
Anti-Zfp91/FITC 熒光素標(biāo)記白血病相關(guān)新基因抗體IgG
人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38?Anti-ZNF217
Melamine/BSA 三聚氰胺偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mg Melamine/BSA 三聚氰胺偶聯(lián)牛血清白蛋白 Melamine/BSA 三聚氰胺偶聯(lián)牛血清白蛋白
Melamine/Bov IgG 三聚氰胺偶聯(lián)牛IgG 1mg Melamine/Bov IgG 三聚氰胺偶聯(lián)牛IgG