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細胞名稱 大鼠正常食管上皮細胞;RNEEC/HL-011
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
細胞種類
凍存
對培養(yǎng)的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養(yǎng)基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養(yǎng)基的冰點,并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞,導(dǎo)致細胞死亡)。
注:DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。
細胞凍存指導(dǎo)原則
凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。與其他細胞培養(yǎng)操作一樣,我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得結(jié)果。
1)在高細胞濃度情況下進行培養(yǎng)細胞的凍存,并且細胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2)細胞應(yīng)緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4)將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時,冷凍的細胞將開始變質(zhì)。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存
6)必須穿戴個人防護設(shè)備。
7)所有與細胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無菌狀態(tài)。必須采用正確的無菌技術(shù),并且在層流通風(fēng)櫥內(nèi)進行。
凍存培養(yǎng)基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
7-O-β-D-glucoside " "≥98% "
類葉升麻苷 Verbascoside "≥98% "
麥角甾苷 Verbascoside "≥98% "
毛蕊異黃酮-7-O-β-D葡萄糖苷 calycosin-7-O-β-D-glucoside 97%
霉酚酸酯 Mycophenolate mofetil "≥98% "
"棉籽糖 " Raffinose "≥98% "
"棉子糖 " Raffinose "≥98% "
莫諾苷 Morroniside 97%
莫諾忍冬苷 Morroniside 97%
擬人參皂苷-RT5 Pseudoginsenoside-RT5 ≥98%
"鳥苷 " GUANOSINE "≥98% "
"尿囊素 " Allantoin "≥98% "
"檸檬酸 " Citric acid monohydrate "≥98% "
牛蒡子苷元 Arctigenin "≥98% "
?;切廴パ跄懰?Aesculetin "≥98% "
"牛七堿 " Szechenyine "≥98% "
派利文堿 Perivine "≥98% "
七葉苷 Esculin ≥98%
"漆黃素 " Fisetin "≥98% "
羥基酪醇 Hydroxytyrosol "≥97% "
羥基吳茱萸堿 Hydroxyevodiamine "≥98% "
茄尼醇 Solanesol 98%
"芹菜苷元 " Apigenin "≥98% "
"芹黃素 " Apigenin "≥98% "
秦艽甲素 Gentiannine ≥95%
"秦皮苷 " Fraxin "≥98% "
"秦皮乙素 " Aesculetin "≥98% "
"青陽參苷元 " Qingyangshengenin "≥98% "
"人參苷元F11 " Aglycone F11 ≥97%
鞣花酸 Ellagic acid 95% 98%
"三尖杉寧堿 " "Cephalomannine " "≥95% "
傘形花內(nèi)酯 Umbelliferone 98%
山酚葡萄糖醛酸苷 Kaempferol-3-beta-O-glucuronide "≥98% "
"山苷 " "Kaempferitrin " "≥9
抗體
Anti-IRS-2 胰島素受體底物-2抗體
Anti-IRS-3 胰島素受體底物-3抗體
Anti-IRS-4 胰島素受體底物-4抗體
Anti-Integrin alpha 4/CD49d 整合素α4抗體
Anti-Integrin alpha 7 整合素α7抗體
Anti-Integrin beta 1/CD29 整合素β1抗體
Anti-Integrin alpha 5/CD49e 整合素α5抗體
Anti-Integrin alpha V/CD51 整合素αV抗體
Anti-Integrin alpha 6/CD49f 整合素α6抗體
Anti-Integrin Beta 3/CD61 整合素β3抗體
Anti-JAK1 蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗體
Anti-Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 磷酸化蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗體
Anti-JAK2 蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-2抗體
Anti-phospho-JAK2(Tyr1007+Tyr1008) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體
Anti-phospho-JAK2(Tyr221) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體
Anti-Jak3 蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體
Anti-Phospho-Jak3 (Tyr785) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體
Anti-Phospho-Jak3 (Tyr980/981) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體
Anti-JNK1/3 氨基末端激酶1/3抗體
Anti-JNK2 氨基末端激酶2抗體
Anti-JNK3/MAPK10 氨基末端激酶3抗體
Anti-Jab1 Jun激活區(qū)域-連接蛋白1抗體
Anti-phospho-JNK1/2/3(Thr183/185) 磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗體
Anti-JNK1/2/3 氨基末端激酶1/2/3抗體
大鼠正常食管上皮細胞;RNEEC/HL-011Anti-JAM1/CD321 連接粘附分子1
Anti-p300/KAT3B 轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體
Anti-KCNA5 鉀電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體
Anti-KCNG4/KV6.3 鉀離子通道蛋白G蛋白4抗體