細(xì)胞名稱 大鼠肝癌細(xì)胞；CBRH-7919

形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，20%

傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況 PN

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測 陰性

STR

同工酶

染色體

產(chǎn)品圖片：

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格:  100g 作用：  用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名稱： CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格:  250g 作用：  用于溶血性鏈球菌及其它營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名稱： CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗，還用于藥品中梭菌的檢測。(《中華人民共和國藥典》201... 英文名稱： NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格:  250g 作用：  加入脫纖維羊血或兔血，制成血瓊脂培養(yǎng)基，用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10－... 英文名稱： HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格:  250g 作用：  可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱： HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格:  2x5支 作用：  試劑A和試劑B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名稱： SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱： IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名稱： IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名稱： PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格:  10支 作用：  每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名稱： TNF

23-羥基白樺酸 Anemosapogenin ≥98%

25-羥基-原人參二醇 25-OH-Protopanaxdiol ≥97%

25-羥基-原人參三醇 25-OH-Protopanaxtiol ≥97%

3,6’－二芥子?；崽?3,6’－Disinapoyl sucrose ≥95%

3’-甲氧基葛根素 3’- Methoxy Puerarin ≥99%

3’-羥基葛根素 3'-hydroxy Puerarin ≥97%

4-去甲氧基鬼臼毒素 4'-Demethylpodophyllotoxin ≥97%

6-羥基-7甲氧基香豆素 6-hydroxy-7-methoxy-2H-chromen-2-one 97%

花椒毒素 8-Methoxypsoralen 8-甲氧基補骨脂素 ≥98%

β,β-二甲基丙烯酰紫草素 β,β-dimethylacrylshikonin ≥97%

β-常山堿 β-Febrifugine 97%

巴卡亭III Baccatin III ≥98%

菝葜皂苷元 Sarsasapogenin ≥98%

白樺酯酸 Betulinic acid ≥98%

樺木酸 Betulinic acid ≥98%

白蠟樹精 fraxinol ≥97%

白屈菜堿 Chelidonine 95%

白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ Atractylenolide III ≥98%

白頭翁皂苷A3 Anemoside A3 Pulchinenoside A3 95%

表兒茶素EC EC ≥98%

表兒茶素沒食子酸酯(ECG) ECG ≥98%

表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG） EGCG ≥98%

補骨脂定 Psoralidin ≥97%

補骨脂甲素 Bavachin（補骨脂二氫黃酮） 97%

補骨脂乙素 Isobavachalcone（異補骨脂查爾酮） 97%

長春地辛 Vindesine 95%

川續(xù)斷皂苷VI Akebia saponin D ≥98%

白激酶抗體

Anti-Phospho-LKB1(Thr189)  磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體

Anti-LFABP/FABP-1  肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體

Anti-LFABP/FABP-2  肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體

Anti-laminin  層粘連蛋白抗體

Anti-Laminin Beta 1  層粘連蛋白β1抗體

Anti-lamin A  核纖層蛋白A抗體

Anti-Phospho-Lamin A/C (Ser22)  磷酸化核纖層蛋白A/C抗體

Anti-Lamin B  核纖層蛋白B抗體

Anti-lamin C  核纖層蛋白C抗體

Anti-LOX-1/OLR1  凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體

Anti-EDG2/LPA1  溶血磷脂酸受體蛋白1抗體

Anti-EDG4/LPA2  溶血磷脂酸受體蛋白2抗體

Anti-EDG7/LPA3  溶血磷脂酸受體蛋白3抗體

Anti-EDG6/SLP4  內(nèi)皮細(xì)胞的分化蛋白6抗體

Anti-Lpin1 protein  Lpin1 抗體

Anti-Lpin1 protein  Lpin1 抗體

Anti-LPL/PLASTIN2  脂蛋白脂酶抗體

Anti-LPLUNC1  鼻咽癌癌基因抗體

Anti-LRIG1  LRIG1抗體

Anti-LRIG2  LRIG2抗體

大鼠肝癌細(xì)胞；CBRH-7919Anti-LRIG3  LRIG3抗體

Anti-LRP/MVP  肺耐藥相關(guān)蛋白抗體

Anti-LRP1/CD91  低密度脂蛋白相關(guān)受體1抗體

Anti-LRP6  低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體

操作方法:
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富，可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃，225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control pUC19計算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復(fù)蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。