細(xì)胞名稱 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO/HCH18-M II
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
產(chǎn)品圖片:
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
匹克氏肉湯基礎(chǔ) 規(guī)格: 100g 作用: 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(參考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名稱: CD36
肉浸液肉湯 規(guī)格: 250g 作用: 用于金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn)) 英文名稱: KLK11
葡萄糖肉浸液肉湯 規(guī)格: 250g 作用: 用于溶血性鏈球菌及其它營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名稱: CD97
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用: 用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn),還用于藥品中梭菌的檢測(cè)。(《中華人民共和國(guó)藥典》201... 英文名稱: NTRK3
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 作用: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養(yǎng)基,用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10-... 英文名稱: HA
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 作用: 可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng),特別用于消毒劑消毒效果的測(cè)試、金黃色葡萄球菌的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟... 英文名稱: HA
Fraser肉湯增菌液FB1配套試劑 規(guī)格: 2x5支 作用: 試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名稱: SPARCL1
PALCAM瓊脂凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM瓊脂。 英文名稱: IL1RL1
李氏增菌液LB2凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名稱: IL13RA1
李氏增菌液LB1凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名稱: PECAM1
EB增菌液凍干配套試劑 規(guī)格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名稱: TNF
350mg
95-85-2 氯唑沙宗相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
67-97-0 維生素D3標(biāo)準(zhǔn)品 Cholecalciferol (Vitamin D3) 30mg×5ampules
14214-69-8 △-4,6-膽甾二烯醇標(biāo)準(zhǔn)品 Delta-4,6-cholestadienol 30mg
1182-42-9 膽固醇辛酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Cholesteryl Caprylate 200mg
11041-12-6 考來(lái)烯胺樹(shù)脂標(biāo)準(zhǔn)品 Cholestyramine Resin 500mg
81-25-4 膽酸標(biāo)準(zhǔn)品 Cholic Acid (AS) 2g
87-67-2 重酒石酸膽堿標(biāo)準(zhǔn)品 Choline Bitartrate 200mg
67-48-1 氯化膽堿標(biāo)準(zhǔn)品 Choline Chloride 200mg
過(guò)硫頭孢尼西鈉標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
吡啶甲酸鉻標(biāo)準(zhǔn)品 Chromium Picolinate 100mg
9004-7-3 糜蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)品 300mg
29342-05-0 環(huán)吡酮標(biāo)準(zhǔn)品 Ciclopirox 50mg
環(huán)吡酮相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Ciclopirox Related Compound A 25mg
41621-49-2 環(huán)砒酮胺標(biāo)準(zhǔn)品 Ciclopirox Olamine 125mg
14818-35-0 環(huán)吡酮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Ciclopirox Related Compound B 25mg
西司他丁銨標(biāo)準(zhǔn)品 Cilastatin Ammonium Salt 100mg
51481-61-9 西咪替丁標(biāo)準(zhǔn)品 Cimetidine 200mg
70059-30-2 鹽酸西咪替丁標(biāo)準(zhǔn)品 Cimetidine Hydrochloride 200mg
28657-80-9 西諾沙星標(biāo)準(zhǔn)品 Cinoxacin 200mg
81098-60-4 西沙必利標(biāo)準(zhǔn)品 Cisapride 200mg
219861-53-7 R-西酞普蘭草酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
73963-72-1 西洛他唑標(biāo)準(zhǔn)品 Cilostazol 200mg
54197-66-9 西洛他唑相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
73963-62-9 西洛他唑相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
865792-18-3 西洛他唑相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
西酞普蘭相關(guān)物質(zhì)G標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
4291-63-8 克拉曲濱標(biāo)準(zhǔn)品 Cladribine 200mg
24757-70-8 克拉曲濱相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Cl
Anti-Ack1(Phospho-Tyr284) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化Ack1抗體IgG
Anti-Phospho-Ack1(Tyr857/858) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、小鼠磷酸化Ack1抗體IgG
Anti-Phospho-Ack1(Tyr326) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化Ack1抗體IgG
Anti-ACTH 1-39/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠ACTH抗體IgG
Anti-ACTH(7-23)/FITC 熒光素標(biāo)記促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)抗體IgG
ACTH(18-39)/FITC 熒光素標(biāo)記ACTH(18-39)抗體IgG
Anti-Actin Alpha /Alpha-SMA/FITC 熒光素標(biāo)記Actin α 蛋白抗體IgG
Anti-Actin Alpha / Alpha-SMA/RBITC 紅色熒光素標(biāo)記肌動(dòng)蛋白α抗體IgG
Anti- Beta-Actin/FITC 熒光素標(biāo)記β-肌動(dòng)蛋白抗體IgG
Anti-F-Actin/FITC 熒光素標(biāo)記抗F-肌動(dòng)蛋白抗體
Anti- Alpha-ACTN4/FITC 熒光素標(biāo)記抗α-輔肌動(dòng)蛋白4抗體IgG
Anti-ADAM-TS1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型抗體IgG
Anti-ADAM10/MADM/CD156c/FITC 熒光素標(biāo)記去整合素樣金屬蛋白酶10抗體IgG
Anti-ADAM-TS7/FITC 熒光素標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體IgG
Anti-14-3-3 family protein/FITC 熒光素標(biāo)記植物14-3-3蛋白抗體IgG
Anti-ADAM-TS7/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7(N端)抗體IgG
Anti-ADAM-TS12/FITC 熒光素標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體IgG
Anti-ACV-A/FITC 熒光素標(biāo)記活化素A抗體IgG
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO/HCH18-M IIAnti-Adducin protein/FITC 熒光素標(biāo)記內(nèi)收蛋白抗體IgG
Anti-Adenosine A2A-R/FITC 熒光素標(biāo)記腺苷A2A受體抗體IgG
Anti-ADFP/ADRP/adipophilin/FITC 熒光素標(biāo)記脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體IgG
Anti-DRP3/FITC 熒光素標(biāo)記Dys
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營(yíng)養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí),30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。