細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

小鼠胎盤絨毛膜分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當?shù)莫毩⑿浴ＬケP還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后，在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起，以細胞滋養(yǎng)層為中軸，外裹合體滋養(yǎng)層，稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸，使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織，并與胚體內(nèi)的血管相通時，次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細胞滋養(yǎng)層細胞形成細胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育，叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤，而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。

方法簡介：

實驗室分離的小鼠胎盤絨毛膜采用-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的小鼠胎盤絨毛膜經(jīng)hCG免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠胎盤絨毛膜體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠熱休克蛋白β6(HSPβ6)試劑盒 ，英文名： HSPβ6 ELISA Kit

Mouse vascular endothelial cell growth factor receptor 1 (VEGFR-1) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)試劑盒

RatAquaporin5,AQP-5ELISAKit 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforGTE-AGE(HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts)ELISAKit人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物

細胞超長鏈脂酰脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量試劑盒20次

Rattumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AILR4ELISAKit大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISAKit   ELISA

小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISAKit   ELISA

小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISAKit   ELISA

小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISAKit   ELISA

泛素特異性蛋白酶OTB1抗體

APC標記的單羧酸轉(zhuǎn)運蛋白2抗體

CES5A重組小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白 Protein

BCHE(butyrylcholinesterase 0.5mgBCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰脂酶抗原(C端)

ENTPD5重組人 ENTPD5 蛋白 Protein

CLEC3B Protein Human 重組人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白

COL4A3 Protein Rat 重組大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 標簽)

BCHE(butyrylcholinesterase 0.5mgBCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰脂酶抗原(C端)

CLEC3B Protein Human 重組人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白

CES5A重組小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白 Protein

COL4A3 Protein Rat 重組大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 標簽)

ENTPD5重組人 ENTPD5 蛋白 Protein

小鼠胎盤絨毛膜細胞小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)試劑盒

HumanMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)pcr檢測試劑盒分裝

DuckIerferonγ,IFN-γ試劑盒鴨γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞組蛋白熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mousediamineoxidase,DAOELISAKit小鼠氧化酶(DAO)試劑盒規(guī)格：96T/48T

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取