| 商品屬性:
組織來源 | 腦組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7716 | 生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 雙極、多極形 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
| 細(xì)胞介紹:
小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。少突膠質(zhì)細(xì)胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),在銀浸染標(biāo)本中,少突膠質(zhì)細(xì)胞比星狀膠質(zhì)細(xì)胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞或寡突膠質(zhì)細(xì)胞。少突膠質(zhì)細(xì)胞(oligodendrocyte)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的成髓鞘神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,其發(fā)育要經(jīng)歷少突膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞、前少突膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞、未成熟和成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞等階段。有學(xué)者將少突膠質(zhì)細(xì)胞按其發(fā)育程度和形態(tài)分為三型。但是,細(xì)胞發(fā)育是一個(gè)連續(xù)的過程,其形態(tài)、表達(dá)產(chǎn)物和功能的演變沒有嚴(yán)格的界限,因此,其分類是相對的。這三型分別為:Ⅰ型少突膠質(zhì)細(xì)胞又稱前O2A(pre-O2A progenitor cell)。細(xì)胞呈圓形,表面光滑,直徑約3μm,體外混合培養(yǎng)時(shí)成簇生長在星形膠質(zhì)表面,具有很強(qiáng)的分裂增殖潛力,表達(dá)GM1、波形蛋白和多唾液酸—神經(jīng)粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion molecule,PSA-NCAM)等。Ⅱ型少突膠質(zhì)細(xì)胞胞體常有雙極或三極突起,極少數(shù)為單極突起,直徑約7μm,有一定的分裂增殖能力。體外培養(yǎng)時(shí)為雙潛能細(xì)胞,既可分化為少突膠質(zhì)細(xì)胞又可分化為Ⅱ型星形膠質(zhì),故又稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞-Ⅱ型星形膠質(zhì)祖細(xì)胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell,O2A)。O2A除表達(dá)GM1和波形蛋白外還表達(dá)GD3和GQ(淋巴雜交瘤株A2B5產(chǎn)生GQ的抗體),故常用A2B5抗體標(biāo)記O2A。Ⅲ型少突膠質(zhì)細(xì)胞不再具有分裂增殖能力,為分裂終期細(xì)胞。直徑約10μm。根據(jù)其形成髓鞘的能力,又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質(zhì)細(xì)胞。不成熟的OL胞體常伸出4~5條較粗大突起,表面還殘留有A2B5標(biāo)記物,同時(shí)也表達(dá)O1-O4抗原,無形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞突起有如蜘蛛網(wǎng),大量表達(dá)半乳糖腦苷脂(galactocerebro side,GC)、蛋白脂蛋白(proteio lipid protein,PLP)、髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)等,有對軸突髓鞘化的能力。體外培養(yǎng)的少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞(簡稱少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞)包括前O2A和O2A和未成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞,前兩者具有增殖能力。
| 方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)采用消化、混合細(xì)胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
| 質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體經(jīng)A2B5免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
| 培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、PDGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2天半量換液1次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 雙極、多極形
傳代特性 不傳代,不增值,存活1-2周
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
| 細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 注意事項(xiàng):
1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺(tái)盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常, 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力,請拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后,請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng),待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度 80%左右時(shí)正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián) 系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細(xì)胞僅供科研使用。
| 公司正在出售的產(chǎn)品
大鼠雌激素(E)試劑盒 ,英文名: E ELISA Kit
Mouse collagen type IV (Col IV) ELISA Kit 小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)試劑盒
ELISA 小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLFA-3/CD58ELISAKit大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3
通用型HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitET內(nèi)毒素
兔子氧化低密度脂蛋白試劑盒 兔子氧化低密度脂蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子氧化低密度脂蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子氧化低密度脂蛋白試劑盒、兔子氧化低密度脂蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子血小板因子4試劑盒 兔子血小板因子4試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子血小板因子4試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血小板因子4試劑盒、兔子血小板因子4eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子血小板衍生生長因子試劑盒 兔子血小板衍生生長因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子血小板衍生生長因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血小板衍生生長因子試劑盒、兔子血小板衍生生長因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子血小板活化因子試劑盒 兔子血小板活化因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子血小板活化因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子血小板活化因子試劑盒、兔子血小板活化因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體
小鼠病毒(MVM)試劑盒 96T/48T
Human squamous cell carcinoma related aigen (SCCAg) ELISA Kit 人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)試劑盒
HumanCCAAT/enhancerbindingproteindeta,C/EBPδELISAKit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickenmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/B試劑盒雞主要組織相容性復(fù)合體(MHC/B)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞NFKAPPABP65蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFreeThyroxine,FT4ELISAKit小鼠游離甲狀腺素(FT4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
肝細(xì)胞生長因子激活抑制蛋白2抗體
CST3重組人 Cystatin C / CST3 蛋白 Protein
前列腺素I合酶(PTGIS)重組蛋白 Recombinant Prostaglandin I Synthase (PTGIS)
GMFG重組人 GMFG / Glia maturation factor, gamma 蛋白 Protein
FZD5 Protein Human 重組人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白
HA Protein H10N9 重組甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞前列腺素I合酶(PTGIS)重組蛋白 Recombinant Prostaglandin I Synthase (PTGIS)
FZD5 Protein Human 重組人 Frizzled-5 / FZD5 蛋白
CST3重組人 Cystatin C / CST3 蛋白 Protein
HA Protein H10N9 重組甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
GMFG重組人 GMFG / Glia maturation factor, gamma 蛋白 Protein