細胞簡介：
小鼠肺大動脈平滑肌分離自肺大動脈組織；肺大動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室，在主動脈之前向左上后方斜行，在主動脈弓下方分為左、右肺動脈，經(jīng)肺門入肺。肺動脈干位于心包內(nèi)，為一粗短的動脈干。起自右心室，在升主動脈前方向左后上方斜行，至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短，在左主支氣管前方橫行，分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗，經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。肺大動脈平滑肌細胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細胞之一，在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺大動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。肺大動脈平滑肌細胞的異常是肺動脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征，其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵。研究表明，急性和慢性缺氧均可導(dǎo)致肺動脈高壓，即缺氧性肺動脈高壓，推斷缺氧可能是通過促進肺大動脈平滑肌細胞的增殖而參與缺氧性肺動脈高壓的發(fā)生發(fā)展。肺大動脈平滑肌細胞主要功能：①細胞表面表達介質(zhì)（ICAM-1和VCAM-1）參與血管壁炎癥反應(yīng)；②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細胞。肺大動脈平滑肌細胞與主要病生理變化：①平滑肌增生易致肺動脈高壓；②先天性肺動脈狹窄；③肺動脈栓塞。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠肺大動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠肺大動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 肺動脈組織 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7046 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代步驟：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠白介素7(IL-7)試劑盒 ，英文名： IL-7 ELISA Kit
Mouse ierleukin 17 (IL-17) ELISA Kit 小鼠白介素17(IL-17)試劑盒
ELISA 小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子4(mouse GATA4) 進口分裝
CLIAKitforIP-10/CXCL10ELISAKit大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10
通用型脯(proline)含量比色法定量試劑盒20次
ELISAKiAES大鼠正常T細胞表達和分泌因子
小鼠白介素-6(mouse IL-6) 作用： ELISA
小鼠白介素-7(mouse IL-7) 作用： ELISA
小鼠白介素-8(mouse IL-8) 作用： ELISA
小鼠白介素-9(mouse IL-9) 作用： ELISA
4號染色體開放閱讀框51抗體
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human neurofilame protein (NF) ELISA Kit 人神經(jīng)絲蛋白(NF)試劑盒
HumanApolipoproteinH,apo-HELISAKit 人載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-IVIgGaibody試劑盒人抗IVIgG抗體試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物鎂ATP酶(Mg++-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次
HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISAKit人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)試劑盒規(guī)格：96T/48T
磷酸化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白SCG10抗體
UCHL1重組大鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白 Protein
HCV-NS4a 丙型肝病毒-NS4a(抗原 0.5mgHCV-NS4a 丙型肝病毒-NS4a(抗原)
SERPINA12重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 Protein
EPHB3 Protein Human 重組人 EphB3 / HEK2 蛋白 (aa 585-998, His & GST 標(biāo)簽)
PGK1 Protein Mouse 重組小鼠 PGK1 / PGKA 蛋白
小鼠肺大動脈平滑肌細胞HCV-NS4a 丙型肝病毒-NS4a(抗原 0.5mgHCV-NS4a 丙型肝病毒-NS4a(抗原)
EPHB3 Protein Human 重組人 EphB3 / HEK2 蛋白 (aa 585-998, His & GST 標(biāo)簽)
UCHL1重組大鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白 Protein
PGK1 Protein Mouse 重組小鼠 PGK1 / PGKA 蛋白
SERPINA12重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 Protein
