細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人真皮毛乳頭分離自皮膚毛囊組織；毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭，中心是一根毛發(fā)，立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上，附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸，毛囊在皮膚表面的開(kāi)口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度，它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(gè)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊實(shí)際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成，除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭（毛乳頭）外，毛囊其余部分都是由表皮細(xì)胞分化而來(lái)。真皮毛乳頭細(xì)胞位于毛囊基底部，是一類成纖維細(xì)胞。在毛囊發(fā)育早期，真皮細(xì)胞向單層上皮細(xì)胞發(fā)出第一真皮信號(hào)，刺激上皮局部形成毛基板。隨后毛基板細(xì)胞向下方的真皮發(fā)出第一表皮信號(hào)，誘導(dǎo)其形成有成纖維細(xì)胞組成的凝集細(xì)胞團(tuán)。在此過(guò)程中，毛母質(zhì)細(xì)胞逐漸包裹凝集細(xì)胞團(tuán)，形成成熟的真皮毛乳頭細(xì)胞。作為毛囊中的重要細(xì)胞群，真皮毛乳頭細(xì)胞的分子機(jī)制和臨床應(yīng)用正在被逐漸認(rèn)識(shí)和解析。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的人真皮毛乳頭采用膠原酶 - 混合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的人真皮毛乳頭經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來(lái)源 | 毛囊 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X8312 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 |
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含FBS、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
人真皮毛乳頭體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA 試劑盒
Human visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 人內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒
Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GuineapigGrowthhormone,GH試劑盒豚鼠生長(zhǎng)激素(GH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母酸性0酸酶總活性比色法定量試劑盒20次
Mousec-fosELISAKit小鼠c-fos試劑盒規(guī)格：96T/48T
人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
中心體蛋白152抗體
豚鼠過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物酶(LPO)試劑盒 ，英文名： LPO ELISA Kit
Human hepatitis D virus IgM (HDV IgM) ELISA Kit 人丁型肝IgM(HDV IgM)試劑盒
Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforbFGF(Humanbasicfibroblastgrowthfactor)ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子
細(xì)菌色酶原位染色試劑盒20次
RabbitIerleukin10,IL-10ELISAKit兔子白介素10(IL-10)試劑盒規(guī)格：96T/48T
zeta相關(guān)蛋白70抗體
DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
蛋白激酶Cδ(PKCδ)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)
AHSP重組人 AHSP / ERAF 蛋白 Protein
IL21R Protein Human 重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白
FGFR4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人真皮毛乳頭細(xì)胞A/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine 0.5mgA/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine) A型豬流感病毒H1N1-M2蛋白
IL21R Protein Human 重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白
CDH1重組小鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 Protein
EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
USP46重組人 / 小鼠 USP46 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽) Protein
