檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供
產(chǎn)品全稱:MHCⅢ/HLA-Ⅲ 進(jìn)口檢測(cè)試劑盒
英文名稱:MHCⅢ/HLA-Ⅲ ELISA Kit
產(chǎn)品貨號(hào):A096798
規(guī)格:48T/96T
服務(wù):可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等
保存環(huán)境:2-8℃低溫、避光、防潮
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。 3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 |
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
補(bǔ)體成分1q子成分C(C1qC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Complement Component 1, Q Subcomponent C (C1qC) 96T Homo sapiens (Human)
泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1 (UCHL1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長分化因子11(GDF11)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 11 (GDF11) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長分化因子5(GDF5)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 96T Homo sapiens (Human)
生長分化因子5(GDF5)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 96T Mus musculus (Mouse)
生長分化因子5(GDF5)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長分化因子3(GDF3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Homo sapiens (Human)
生長分化因子3(GDF3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Mus musculus (Mouse)
生長分化因子3(GDF3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長分化因子1(GDF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Homo sapiens (Human)
生長分化因子1(GDF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Mus musculus (Mouse)
生長分化因子1(GDF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Homo sapiens (Human)
干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Mus musculus (Mouse)
干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Rattus norvegicus (Rat)
趨化因子C-基元配體2(XCL2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine C-Motif Ligand 2 (XCL2) 96T Homo sapiens (Human)
VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 96T Homo sapiens (Human)
VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 96T Mus musculus (Mouse)
VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
白細(xì)胞介素24(IL24)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 24 (IL24) 96T Homo sapiens (Human)
白細(xì)胞介素24(IL24)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 24 (IL24) 96T Mus musculus (Mouse)
白細(xì)胞介素24(IL24)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 24 (IL24) 96T Rattus norvegicus (Rat)
白介素20(IL20)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 20 (IL20) 96T Homo sapiens (Human)
白介素29(IL29)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 29 (IL29) 96T Homo sapiens (Human)
白介素22(IL22)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 22 (IL22) 96T Homo sapiens (Human)
白介素22(IL22)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 22 (IL22) 96T Mus musculus (Mouse)
生長分化因子15(GDF15)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15) 96T Homo sapiens (Human)
生長分化因子15(GDF15)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15) 96T Mus musculus (Mouse)
原代內(nèi)皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100ml
原代平滑肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100ml
原代成纖維細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100ml
原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100ml
原代表皮角化細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100ml
原代系膜細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100
原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100ml
原代腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100ml
原代骨細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100
原代滑膜皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100
原代骨骼肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100ml
原代神經(jīng)元細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100ml
原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100ml
原代單核細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100ml
原代軟骨細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基 500/250/100ml
MHCⅢ/HLA-Ⅲ 進(jìn)口檢測(cè)試劑盒原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑 5/2.5/1ml
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑 5/2.5/1ml
原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑 5/2.5/1ml
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑 5/2.5/1ml
原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑 5/2.5/1ml
原代表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑 5/2.5/1ml
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。