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這些問題才是導致 ELISA 測定結(jié)果出錯的元兇在哪里?

2019年06月28日 15:19上海撫生實業(yè)有限公司點擊量:236

                      這些問題才是導致 ELISA 測定結(jié)果出錯的元兇在哪里?
 

   上海撫生實業(yè)有限公司成立于2007年,經(jīng)過數(shù)年的努力已迅速成為集科研和為一體的專業(yè)化生物工程公司。特別是ELISA,代測,技術(shù)服務這一產(chǎn)品已使上海撫生成為中國公司。

ELISA 的基本原理是:
①使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;
②使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標抗原(或抗體),而且此酶標抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
③ 測定時將受檢標本(抗體或抗原)和酶標抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進行反應,再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其 它物質(zhì)分開,*后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物,根據(jù)其顏色反應的深淺 進行定性或定量分析,以了解被測標本中抗體或抗原含量。
ELISA 方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但 ELISA 測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗中除正常反應外,有時??梢姷揭恍╁e誤結(jié)果(即假陽性或假陰性結(jié)果)。引起 ELISA 測定錯誤結(jié)果的原因主要有:①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
本文就標本因素對 ELISA 測定的影響做如下討論。
血清是*常用的 ELISA 標本,血漿一般可視為與血清同等的標本,標本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:
1. 內(nèi)源性物質(zhì)
有人認為大約 40% 的人血清標本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠 Ig (s) 抗體、交叉反應物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
(1)類風濕因子
人血清中 IgM、IgG 型類風濕因子(RF)可以與 ELISA 系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標記二抗的 FC 段直接結(jié)合,從而導致假陽性。

 

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