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細(xì)胞遷移的高通量成像檢測(cè)法

時(shí)間:2015-5-5閱讀:1183
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在研究諸如轉(zhuǎn)移性腫瘤、炎癥和慢性疾病中,觀察細(xì)胞的遷移是一個(gè)很重要的方法。檢測(cè)細(xì)胞遷移的方法有助于更清楚的了解疾病的機(jī)制,對(duì)于治療效果的評(píng)判也是極其重要的。我們介紹一種新的方法, 細(xì)胞遷移檢測(cè)板,用以檢測(cè)細(xì)胞的遷移。
細(xì)胞遷移檢測(cè)板是一個(gè)96孔板形式的耗材,硅膠塊能夠封閉住的中心區(qū)域,使中間區(qū)域無法鋪種細(xì)胞。當(dāng)硅膠塊移除后,周圍細(xì)胞遷移進(jìn)入中心區(qū)域,此時(shí)可以使用活細(xì)胞試劑,如Calcein-AM進(jìn)行熒光標(biāo)記,或?qū)⒓?xì)胞固定后標(biāo)記細(xì)胞核進(jìn)行檢測(cè)分析。
使用ImageXpress Micro高內(nèi)涵系統(tǒng)能夠進(jìn)行整孔成像,因此能夠高速的獲取孔內(nèi)遷移區(qū)域的圖像。
介紹
Oris 細(xì)胞遷移板使用硅膠塊封閉96孔板每個(gè)孔的中心區(qū)域,使中心區(qū)域無法鋪種細(xì)胞,從而在孔中心獲得一個(gè)直徑2mm的環(huán)形檢測(cè)區(qū)域,當(dāng)細(xì)胞發(fā)生遷移,周圍的細(xì)胞會(huì)遷移進(jìn)入中心監(jiān)測(cè)區(qū)域。Oris細(xì)胞遷移板提供多種細(xì)胞外基質(zhì),如I型膠原和纖維粘連蛋白,鋪涂于96孔板,用于細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)。我們采用了HT-1080和MDA-MB-231細(xì)胞在鋪有三種不用細(xì)胞外基質(zhì)的Oris板上研究不同水平MEK抑制劑U0126對(duì)細(xì)胞遷移的作用。該實(shí)驗(yàn)中,我們可以看到ImageXpress Micro高內(nèi)涵系統(tǒng)能夠快速方便的獲得每個(gè)孔內(nèi)包含監(jiān)測(cè)區(qū)域的圖像。軟件系統(tǒng)能夠自動(dòng)計(jì)算孔中心監(jiān)測(cè)區(qū)域遷移細(xì)胞所占據(jù)的面積,從而快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

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