交聯(lián)以及交聯(lián)核酸大分子復(fù)合體的研究

小分子化學(xué)交聯(lián)劑結(jié)合現(xiàn)代化的交聯(lián)質(zhì)譜是一種新興的研究蛋白-蛋白以及蛋白-核酸大分子復(fù)合體的有力手段。目前常用的小分子交聯(lián)劑主要與目標(biāo)蛋白Lys氨基酸殘基反應(yīng)，并且不具有時(shí)空分辨率。發(fā)展小分子交聯(lián)劑能夠性與多個(gè)氨基酸殘基進(jìn)行交聯(lián)并具有時(shí)空分辨率能夠相互作用的研究。

帶有光保護(hù)的醌甲基化物（QM）小分子化學(xué)交聯(lián)劑。使用這些交聯(lián)劑，可以通過(guò)遠(yuǎn)紫外光（365 nm）誘導(dǎo)從而性的釋放活化的醌甲基化物進(jìn)行-以及-核酸之間的交聯(lián)。這種策略不能夠使得蛋白交聯(lián)獲得時(shí)間分辨率，引入的強(qiáng)活性的醌甲基化物可與許多鄰近的親核性的殘基，如 His、Lys、Tyr 等側(cè)鏈反應(yīng)而產(chǎn)生蛋白交聯(lián)。并且這些交聯(lián)劑不使適用單個(gè)蛋白的交聯(lián)，也可以在細(xì)胞裂解液以及在活體細(xì)胞中誘導(dǎo)蛋白-蛋白發(fā)生化學(xué)交聯(lián)。

合成一端帶有醌甲基化物前體，另一端帶有NHS酯基的小分子化學(xué)交聯(lián)劑（NHQM）。通過(guò)對(duì)14-3-3 目標(biāo)蛋白紫外光照射與否以及加不加NHQM交聯(lián)劑處理，發(fā)現(xiàn)只有在加入NHQM交聯(lián)劑并且紫外光照射下才會(huì)誘導(dǎo)產(chǎn)生14-3-3二聚體。并且這種二聚體的產(chǎn)生可以很好的通過(guò)光控實(shí)時(shí)的產(chǎn)生。進(jìn)一步證明了NHQM交聯(lián)劑的其中一個(gè)實(shí)用性-可以鑒別蛋白聚合情況，并且利用化學(xué)交聯(lián)質(zhì)譜鑒別了在14-3-3蛋白上與醌甲基化物反應(yīng)的親和性殘基。與文獻(xiàn)報(bào)道的醌甲基化物的強(qiáng)活性一致，NHQM 可以與大多數(shù)親和性殘基發(fā)生反應(yīng)，包括之前沒(méi)有報(bào)道過(guò)的Gln、Arg、Asn弱的親核基團(tuán)發(fā)生交聯(lián)。

接著，測(cè)試了NHQM在活體細(xì)胞內(nèi)的交聯(lián)情況，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞體內(nèi)交聯(lián)效率較弱，這可能與短時(shí)間內(nèi)NHQM穿膜性和溶解性差有關(guān)，而增長(zhǎng)穿膜時(shí)間NHS會(huì)水解從而使交聯(lián)失效。為了解決這一問(wèn)題，合成了兩端都帶有光保護(hù)基團(tuán)的醌甲基化物前體（HoQM）并并證明它可以用于細(xì)胞以及哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)蛋白分子間交聯(lián)，并且具有時(shí)間選擇性。除了用于蛋白-蛋白交聯(lián)，醌甲基化物可以修飾核酸，后證明了NHQM交聯(lián)劑也可以通過(guò)光控誘導(dǎo)蛋白-核酸交聯(lián)。

相關(guān)產(chǎn)品供應(yīng)列表：

Sulfo-NHS

西安齊岳生物科技有限公司提供 Sulfo-NHS交聯(lián)試劑。

N-hydroxysulfosuccinimide (Sulfo-NHS) is used in conjunction with EDC-HCl (EDAC-HCl) to convert carboxyl groups to Sulfo-NHS esters which react amines. Sulfo-NHS is used as a catalyst for EDC-HCl coupling and greatly increases the efficiency of the reaction.

Alternative Name: Hydroxy-2,5-dioxoyrrolidine-3-sulfonate

CAS #: 106627-54-7

Molecular Weight: 217.1

包裝：100mg，500mg

保存：-20°

貨期：3-4周

Heterobifunctional Crosslinkers異型雙功能交聯(lián)劑：

SMCC Crosslinker           CAS Number: 64987-85-5

Sulfo-SMCC Crosslinker      CAS Number: 92921-24-9

Sulfo-SANPAH Crosslinker    CAS Number: 102568-43-4

SMPH Crosslinker

PDPH Crosslinker

MBS Crosslinker             CAS Number: 58626-38-3

Sulfo-MBS Crosslinker

SPDP Crosslinker            CAS Number: 68181-17-9

LC-SPDP Crosslinker  

Sulfo-LC-SPDP Crosslinker

SIA Crosslinker              CAS Number: 39028-27-8

SBA Crosslinker             CAS Number: 42014-51-7

SMPB Crosslinker           CAS Number: 79886-55-8

BMPS Crosslinker           CAS Number: 55750-62-4

EMCS Crosslinker           CAS Number: 55750-63-5

GMBS Crosslinker          CAS Number: 80307-12-6

ANB-NOS Crosslinker        CAS Number: 60117-35-3

Homobifunctional Crosslinkers同型雙功能交聯(lián)劑：

BS3 Crosslinker           CAS Number: 82436-77-9

DSS Crosslinker           CAS Number: 68528-80-3

BS2G Crosslinker

DSG Crosslinker          CAS Number: 79642-50-5

DSP Crosslinker           CAS Number: 57757-57-0

DTSSP Crosslinker        CAS Number: 81069-02-5

Sulfo-EGS Crosslinker     CAS Number: 167410-92-6

EGS Crosslinker          CAS Number: 70539-42-3

DST Crosslinker          CAS Number: 62069-75-4

Zero-Length Crosslinkers - EDC-HCl, Sulfo-NHS & NHS：

EDC-HCl               CAS Number: 25952-53-8

Sulfo-NHS              CAS Number: 106627-54-7

Deuterated Crosslinker BS3-d4

Deuterated Crosslinker BS2G-d4

Deuterated Crosslinker DSS-d4

（三）：Protein modification regents （蛋白修飾相關(guān)試劑）

Protein Modification Reagents 修飾劑：

SATA Protein Modifier

N-Succinimidyl-S-Acetyl-Thioacetate

CAS Number: 76931-93-6

Sulfo-NHS-Acetate

CAS Number: 152305-87-8

Traut's Reagent  

CAS Number: 4781-83-3

HPG

CAS Number: 24645-80-5

Iodoacetic Acid

CAS Number: 64-69-7

BMPA Modifier

CAS Number: 7423-55-4

（四）：交聯(lián)試劑

Biotinylation Reagents化試劑

Sulfo-NHS-Biotin     CAS Number: 119616-38-5

NHS-Biotin          CAS Number: 35013-72-0

Sulfo-NHS-LC-Biotin  CAS Number: 127062-22-0

NHS-LC-Biotin       CAS Number: 72040-63-2

Sulfo-NHS-SS-Biotin  CAS Number: 325143-98-4

NHS-SS-Biotin       CAS Number: 142439-92-7

Biotin Hydrazide      CAS Number: 66640-86-6

Biotin-HPDP         CAS Number: 129179-83-5

Iodoacetyl-LC-Biotin   CAS Number: 93285-75-7

（五）Immobilization Resins固定化樹(shù)脂

Immobilization Resins固定化樹(shù)脂

Amino-Reactive Resin

Sulfhydryl-Reactive Resin

Carbohydrate-Reactive Resin

Carboxyl-Reactive Resin

Immobilized Pepsin  

Immobilized Chymotrypsin

以上資料源于西安齊岳生物科技有限公司

小編：wyf  2020.10.29