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上海古朵生物科技有限公司

古朵常見(jiàn)問(wèn)題解答:多重免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)

時(shí)間:2022-11-24閱讀:233
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??問(wèn):樣本可以做成冰凍切片嗎?

??答 可以的??乖迯?fù)步驟不推薦用加熱的方法,推薦用抗體洗脫液

??問(wèn) 所有操作要避光嗎?

??答 不需要,在常規(guī)環(huán)境下操作就可以,染料的熒光強(qiáng)度很高。

??問(wèn) 抗體修復(fù)液每一輪修復(fù)都要換嗎?

??答 是的,每一輪都要根據(jù)抗體選擇相應(yīng)的修復(fù)液。

??問(wèn) 染料的選擇會(huì)影響后染色嗎,有共定位的話怎么辦?

??答 共定位的情況,我們可以通過(guò)單一通道觀察來(lái)好的檢測(cè)各指標(biāo)的分布情況,染料不會(huì)對(duì)染色有影響,串色的情況需要預(yù)實(shí)驗(yàn)做充足,包括抗體稀釋比例,染料與放大液比例,修復(fù)條件的確定。

??問(wèn) 多色用的一二抗各是什么種屬?

??答 多色的優(yōu)勢(shì)在于一二抗種屬無(wú)需特別要求,一抗根據(jù)樣本種屬選擇既可,二抗根據(jù)一抗選擇即可,多個(gè)抗體組合,種屬不會(huì)有影響。

??問(wèn) 抗體洗脫和微波修復(fù)哪種方式洗脫?

??答 微波修復(fù)洗脫穩(wěn)定,抗體洗脫液對(duì)大多數(shù)抗體都管用,難洗的抗體延長(zhǎng)洗脫時(shí)間就可以啦!

??問(wèn) 實(shí)驗(yàn)用時(shí)真的一天能做完嗎?

??答 相比普通的組織熒光實(shí)驗(yàn),我們一抗的孵育時(shí)間只需室溫30min,二抗和信號(hào)放大步驟只需孵育10min,能大大節(jié)約時(shí)間,五色左右可在一天內(nèi)做完。

??問(wèn) 多色樣本的寄送有條件限制嗎?

??答 正常的石蠟切片和組織芯片很穩(wěn)定,只要防震盒常溫運(yùn)輸即可,冰凍切片的話,需要干冰低溫運(yùn)輸。

??問(wèn) 我的組織還有GFP蛋白,給結(jié)果的時(shí)候能排除干擾嗎?

??答 可以的,結(jié)果分析的時(shí)候可以避免綠色通道,分析軟件賦予的顏色是偽彩色,可以換其他顏色。

??問(wèn) 我這邊提供抗體的話,抗體需要滿足什么條件嗎?

??答 抗體起碼要滿足IHC/IF的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用,各品牌供應(yīng)商都會(huì)提供相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的,我司組化抗體經(jīng)過(guò)嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,是不錯(cuò)的選擇。

??問(wèn) 如果我能提供抗體給你們做服務(wù)的話,需要的抗體量是多少?

??答 需要的抗體量要根據(jù)樣本數(shù)來(lái),但一般來(lái)講,50-100ul的抗體足夠完成預(yù)實(shí)驗(yàn)+正式實(shí)驗(yàn)了。問(wèn) 在指標(biāo)與染料的搭配以及染色順序上,有什么規(guī)律嗎?

??答 并沒(méi)有一個(gè)特別的線性關(guān)系,和蛋白的種類、表達(dá)量以及修復(fù)條件都有關(guān)系,所以會(huì)多因素考慮,多嘗試,預(yù)實(shí)驗(yàn)很重要。

??問(wèn) TSA技術(shù)原理中有抗體洗脫的步驟,但是在你們的試劑盒步驟說(shuō)明中卻沒(méi)有?

??答 試劑盒步驟中的抗原修復(fù)過(guò)程就是抗體洗脫過(guò)程。

??問(wèn) B細(xì)胞、T細(xì)胞、DC細(xì)胞常用maker能推薦下嗎?

??答

??T細(xì)胞:CD3、CD4、CD8、FoxP3(再細(xì)化還有:GranzymeB、PD-1、TIM-3、CD45)

??B細(xì)胞:CD19 ;

??DC細(xì)胞:CD8α、CD11b

??多重免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)  上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國(guó)家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向,不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。


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