細(xì)胞:GC-2 spd細(xì)胞
中文名稱:小鼠精母細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢萠酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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研究發(fā)現(xiàn),能夠?qū)⒁延械臄?shù)據(jù)整理成相對(duì)較小的數(shù)據(jù)串,從中他們觀察到在細(xì)胞因子生產(chǎn)過程中,在不同類型的配體之間發(fā)生了相似的協(xié)同行為。
比如說,Toll樣受體和g蛋白偶聯(lián)受體之間的協(xié)同刺激,在分析六種細(xì)胞因子時(shí),始終會(huì)導(dǎo)致一種特定類型的生產(chǎn)和抑制行為的發(fā)生,相比之下,Toll樣受體的刺激行為,僅僅能導(dǎo)致這六種細(xì)胞因子產(chǎn)量的增加。
假定存在著一種“交互作用劑",他們將這種命名解釋為“一種信號(hào)回路",可以將不同類型的配體-受體激活途徑特定性地連接在一起,以便獲得特殊的協(xié)同效應(yīng)。
他們建議,對(duì)這些交互作用劑進(jìn)行鑒定,已經(jīng)被證明對(duì)于正確理解細(xì)胞的信號(hào)過程是十分必要的。
在這些成對(duì)的組合被考慮進(jìn)去的情況下,在最終調(diào)節(jié)細(xì)胞輸出時(shí),配體就開始顯示出它們對(duì)外界的依賴性這一特征來,獲得的數(shù)據(jù)表明,很多輸入配體的基本活動(dòng),與其說是對(duì)細(xì)胞輸出的直接控制,倒不如說是對(duì)其它信號(hào)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。