細(xì)胞:GES-1細(xì)胞
中文名稱:人胃粘膜細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢萠酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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研究人員分析產(chǎn)生的圖像顯示,在細(xì)胞向前運(yùn)動時,它的骨架上的物理壓力會引發(fā)分子指和手去抓緊并加固使這個骨架穩(wěn)固的連接。
(人 U251細(xì)胞 神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞)(人 U937細(xì)胞 U-937細(xì)胞 淋巴瘤細(xì)胞)
這種圖像顯示出了一種叫做alpha-actinin的蛋白如何將自己的結(jié)構(gòu)拆開一部分,并形成一種內(nèi)部分子“臂"以伸向另外的一種叫做鈕帶蛋白的分子。紐帶蛋白也會發(fā)生部分拆分,從而形成若干分子“指"。
(猴 VERO細(xì)胞 猴腎細(xì)胞)(小鼠 AtT-20細(xì)胞 AtT20細(xì)胞 垂體瘤細(xì)胞)
研究人員利用X射線晶體衍射技術(shù)創(chuàng)造出了這些圖像,從而揭示出alpha-actinin如何召集紐帶蛋白來幫助它在細(xì)胞運(yùn)動過程中抱住細(xì)胞的骨架。
(人 BGC-823細(xì)胞 BGC823細(xì)胞 胃腺癌細(xì)胞)(小鼠 BV2細(xì)胞 膠質(zhì)細(xì)胞)
這一發(fā)現(xiàn)非常重要,因為沒有紐帶蛋白加固細(xì)胞骨架,細(xì)胞會快速并自由運(yùn)動從而無法完成細(xì)胞的目的性運(yùn)動——這意味著細(xì)胞無法在發(fā)育的胚胎中進(jìn)行適當(dāng)?shù)倪w移并到達(dá)它們最終的位置。
(猴 CV-1細(xì)胞 CV1細(xì)胞 猴腎細(xì)胞)(小鼠 Fox-NY細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞)
因此,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞如何指導(dǎo)它們的運(yùn)動將幫助研究人員更好地了解胚胎發(fā)育以及一些癌癥的擴(kuò)散過程。