細胞:GC-1 spg細胞
中文名稱:小鼠精原細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢萠酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當的培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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在信號加工過程之間對相互作用進行特征分析,而這些加工過程由22個不同受體-配體對引發(fā),總共有231對組合。
他們的切入點從檢查每一單個配體對于264.7RAW巨嗜細胞的效果開始,對鈣元素流、蛋白質磷酸化和細胞因子生產等結果進行定量分析。
獲得了這些單一的特征之后,他們繼續(xù)分析這些成對的引發(fā)物,接著將最終獲得的結果與以前預測將要在最為簡單的“額外"場景中發(fā)生的結果進行對比。
當獲得的結果與以前的預測有顯著差異時,他們認為在被刺激的各種途徑中存在著一種相互作用,導致了一種更為復雜的輸入-輸出關系的產生。
被研究的配體,在生產細胞因子的調節(jié)過程中都至少會和一個其它的配體發(fā)生協同性的交互作用,雖然甚至有幾個配體對這些過程并沒有顯示出獨立的效果。