細(xì)胞:HEC-1-A細(xì)胞
中文名稱:人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細(xì)胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)。
HEC-1-A細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
以普通大鼠腎臟細(xì)胞為研究對象,發(fā)現(xiàn)這些細(xì)胞在遷移的過程中會不斷地向胞外釋放內(nèi)容物,這種新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞事件被稱為遷移胞吐作用(migracytosis)。
(雞DT40細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 雞淋巴瘤細(xì)胞)(人A549細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人肺腺癌細(xì)胞 )
細(xì)胞在遷移的過程中會將其收縮纖維留在胞體后側(cè)。在收縮纖維的橫截面處會有很多直徑約為3um的囊泡,即為新發(fā)現(xiàn)的"遷移小體"。
(小鼠Raw264.7細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 小鼠單核巨噬細(xì)胞)
這些遷移小體中還包括有很多直徑約50-100nm的小泡。最終收縮纖維會發(fā)生斷裂,從而這些遷移小體會釋放到胞外并被周圍的細(xì)胞吞噬。(RGC-5細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫RGC-5細(xì)胞信息)
通過密度梯度離心的方法得到了細(xì)胞裂解物的不同組分,比較發(fā)現(xiàn)migrasome富集在某一特定的組分中。
(鼠661W細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞)
通過質(zhì)譜的手段篩選了一系列migrasome特異性的蛋白,在大量膜蛋白與細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白的候選物中,發(fā)現(xiàn)Tetraspanin-4(TSPAN4)是其中migrasome定位最準(zhǔn)確的蛋白質(zhì),人工構(gòu)建了(TSPAN4)-熒光報告基因供后續(xù)研究。
(人DLD-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)(人Siha細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人宮頸細(xì)胞)