細(xì)胞：HEK-a細(xì)胞
中文名稱：人表皮角質(zhì)細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí)）。
HEK-a細(xì)胞傳代：
1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。
2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)；
（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。
3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）
這些遷移小體中還包括有很多直徑約50-100nm的小泡。最終收縮纖維會(huì)發(fā)生斷裂，從而這些遷移小體會(huì)釋放到胞外并被周圍的細(xì)胞吞噬。
（RGC-5細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) RGC-5細(xì)胞信息）
通過(guò)密度梯度離心的方法得到了細(xì)胞裂解物的不同組分，比較發(fā)現(xiàn)migrasome富集在某一特定的組分中。
通過(guò)質(zhì)譜的手段篩選了一系列migrasome特異性的蛋白，在大量膜蛋白與細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白的候選物中，發(fā)現(xiàn)Tetraspanin-4(TSPAN4)是其中migrasome定位最準(zhǔn)確的蛋白質(zhì)，人工構(gòu)建了(TSPAN4)-熒光報(bào)告基因供后續(xù)研究。
（人DLD-1細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞）（人Siha細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人宮頸細(xì)胞）
當(dāng)細(xì)胞密度很大時(shí)，TSPAN4在細(xì)胞內(nèi)的分布十分彌散，只有在細(xì)胞膜上有少量富集;但是當(dāng)細(xì)胞密度較低時(shí)，隨著細(xì)胞收縮纖維的伸長(zhǎng)，很多TSPAN4富集于收縮纖維區(qū)域，特別是其表面的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。
（小鼠NIH 3T3細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 小鼠成纖維細(xì)胞）（人Huvec細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞）
通過(guò)比較共聚焦顯微鏡成像結(jié)果與電鏡投射結(jié)果，證實(shí)了這部分"環(huán)狀"的結(jié)構(gòu)即之前發(fā)現(xiàn)的migrasome。
（人CNE-2細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人鼻咽癌細(xì)胞 ）
通過(guò)一系列藥物處理，發(fā)現(xiàn)migrasome的形成依賴于細(xì)胞的遷移過(guò)程，而且依賴于細(xì)胞骨架蛋白actin的多聚化。體外過(guò)表達(dá)的實(shí)驗(yàn)與對(duì)動(dòng)物組織的檢測(cè)分別證明migrasome在各類細(xì)胞系以及原代細(xì)胞中是廣泛存在的。
