細(xì)胞：hCMEC/D3細(xì)胞

中文名稱：人永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

生長特性：貼壁

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

收到細(xì)胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí)）。

hCMEC/D3細(xì)胞傳代：

1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。

3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

在健康血液系統(tǒng)中，健康干細(xì)胞會在競爭中勝過具有C/EBPα突變的干細(xì)胞。但當(dāng)輻射降低干細(xì)胞群的健康和適應(yīng)性時(shí)，一直在那的突變細(xì)胞突然得到了接管的機(jī)會。"

（小鼠 L-929細(xì)胞 L929細(xì)胞 結(jié)締組織細(xì)胞株929克?。ê?CV-1細(xì)胞 CV1細(xì)胞 猴腎細(xì)胞）

從花栗鼠和松鼠的角度來思考這一問題：減少生物系統(tǒng)中的花栗鼠種群或許可使得松鼠興旺——尤其如果是減少花栗鼠的途經(jīng)改變了生態(tài)系統(tǒng)從而有利于松鼠，這與輻射改變機(jī)體來支持C/EBPα 突變干細(xì)胞相類似。

（人Kit225細(xì)胞 IL-2依賴的人淋巴T細(xì)胞系）（人H125細(xì)胞 非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞）

這些研究不只是告訴了我們?yōu)槭裁摧椛淇墒乖煅杉?xì)胞分化；它們還證實(shí)了通過激活一條干細(xì)胞維持信號通路，我們可以阻止其發(fā)生。甚至在輻射后數(shù)月，人為地激活受輻射HSCs的NOTCH信號通路可以讓它們再度表現(xiàn)“干性"——在這些本該響應(yīng)輻射發(fā)生分化的HSCs中重啟血細(xì)胞組裝。

（人BT-474細(xì)胞 BT474細(xì)胞 乳導(dǎo)管瘤細(xì)胞）（人HUV-EC-C細(xì)胞 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞）

在以往遭受輻射的HSCs中激活NOTCH時(shí)，遏制住了危險(xiǎn)的C/EBPα細(xì)胞群。與通過激活NOTCH恢復(fù)適應(yīng)性的非C/EBPα突變干細(xì)胞競爭，C/EBPα突變干細(xì)胞沒有了進(jìn)化的空間。

（人RAJI細(xì)胞 淋巴瘤細(xì)胞）（人K562細(xì)胞 慢性髓系白血病細(xì)胞）

如果我在一種有可能經(jīng)受全身輻射的環(huán)境中工作，我會冷凍一堆我的HSCs。在輻射照射后輸注一次健康HSCs將有可能使得健康血液系統(tǒng)在競爭中勝過‘具有編程能力’的輻射照射HSC，甚至是攜帶致癌突變的HSC。希望在未來，我們能夠提供一些藥物來恢復(fù)輻射后留下的干細(xì)胞的適應(yīng)性"。