細胞：CMT-64細胞

中文名稱：小鼠肺癌細胞

生長特性：貼壁

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）。

CMT-64細胞傳代：

1）：細胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據(jù)實際情況，把握消化時間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。

3）：取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。

（網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）

犬瘟熱病毒(CDV)核酸檢測結(jié)果分析判定

反應結(jié)束后保存檢測數(shù)據(jù)文件。根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)baseline的start值（3-8），stop值（13-18）以及Threshold值，使Std curve 窗口下的標準曲線達到最佳（correlation數(shù)值介于-0.97~-1之間，correlation數(shù)值等同于∣r∣值），最后到Reporter窗口下記錄儀器自動分析計算出的未知標本數(shù)值（Qty-Copies/ml）。

犬瘟熱病毒(CDV)核酸檢測質(zhì)控標準：

陰性質(zhì)控品：全部陰性。沒有曲線增長。

CDV-陽性質(zhì)控品：陽性質(zhì)控品的 Ct 值均應小于 35.0。

∣r∣≥0.97（correlation數(shù)值介于-0.97~-1之間，correlation數(shù)值等同于∣r∣值）。

 以上條件應同時滿足 ，否則，此次試驗視為無效，全部試驗應重新進行。

犬瘟熱病毒(CDV)核酸檢測結(jié)果判定：

測定結(jié)果的計算：

如果Ct值﹤38，則實驗樣品的CDV RNA含量(基因拷貝數(shù)/ml)= Qty-Copies/ml。

如果38﹤Ct值﹤40,為灰區(qū)建議重新檢測，重新檢測若38﹤Ct值﹤40判為陽性，否則為陰性。

如果Ct值=40，則CDV RNA含量（基因拷貝數(shù)/ml）﹤1×102Copies/ml (低于檢測下限)。