細胞：ECC-1細胞

中文名稱：人子宮內(nèi)膜癌細胞

生長特性：貼壁

培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）。

ECC-1細胞傳代：

1）：細胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據(jù)實際情況，把握消化時間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。

3）：取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。

（網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）

犬細小病毒(CPV)核酸擴增檢測

實驗目的：適用于檢測犬科動物如狗、貉、狐等動物唾液、嘔吐物、糞便、血清或者病死動物心、腸等實質(zhì)臟器標本中犬細小病毒(CPV)DNA，適用于犬細小病毒(CPV)感染的輔助診斷及流行病學調(diào)查。其檢測結(jié)果僅供參考。

實驗原理：選取一對犬細小病毒(CPV)特異性引物和一條特異性熒光探針，應用堿裂解提取犬細小病毒(CPV)DNA，后者在耐熱DNA聚合酶(Taq酶)作用下，配以FQ-Buffer(內(nèi)含MgP2+P、Tris-HCl等)、四種核苷酸單體(dNTPs)等成分，通過PCR-熒光探針法對犬細小病毒(CPV)進行體外擴增，從而達到實時快速定量檢測之目的。

實驗組成：

（核酸提取液B 4管 500μl/管 ）（Taq酶系 1管 80μl/管 ）（CPV–PCR MIX 1管 960μl/管）

（CPV陽性質(zhì)控品 1管 50μl/管(1×10P7Copies/ml)）（陰性質(zhì)控品 1管 500μl/管）

備注：病毒濃縮液等另行配備。

【質(zhì)控標準】

陰性質(zhì)控品：全部陰性。

CPV陽性質(zhì)控品：陽性質(zhì)控品的 Ct 值均應小于 35.0。

∣r∣≥0.97（correlation數(shù)值介于-0.97~-1之間，correlation數(shù)值等同于∣r∣值）。

 以上條件應同時滿足 ，否則，此次試驗視為無效，全部試驗應重新進行。