細(xì)胞：Capan-1細(xì)胞

中文名稱：人胰腺癌細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁

培養(yǎng)基：IMDM培養(yǎng)基  血清：20%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

Capan-1細(xì)胞傳代：

1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。

3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。

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流感病毒分為A、B、C三個(gè)類型。研究人員陸續(xù)在豬和牛體內(nèi)分離到新的D型流感病毒。

目前，多個(gè)國(guó)家和地區(qū)檢測(cè)到D型流感病毒，牛被認(rèn)為是主要宿主。

它比C型流感病毒存在更廣譜的細(xì)胞嗜性，能夠感染牛、豬、雪貂和豚鼠并通過(guò)接觸傳播感染其他動(dòng)物，有報(bào)道稱在小反芻動(dòng)物如綿羊和山羊等體內(nèi)也存在針對(duì)D型流感病毒的特異性抗體。

研究人員利用結(jié)構(gòu)生物學(xué)手段及功能實(shí)驗(yàn)研究了D型流感病毒表面的糖蛋白HEF，通過(guò)糖點(diǎn)陣芯片實(shí)驗(yàn)證明了D型流感病毒能結(jié)合9-O乙酰唾液酸受體及其多種衍生物。

隨后，研究人員解析了D型流感病毒HEF蛋白及其與不同受體類似物的復(fù)合物結(jié)構(gòu)。

D型流感病毒HEF蛋白受體結(jié)合位點(diǎn)的開(kāi)放通道使得D型流感病毒能夠容納不同的糖環(huán)構(gòu)象，從而結(jié)合9-O乙酰唾液酸受體及其不同衍生物，為其廣泛的細(xì)胞嗜性提供了結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。

科研人員通過(guò)組織免疫熒光實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，D型流感病毒HEF能結(jié)合人、豬和牛的氣管纖毛上皮細(xì)胞。

考慮到D型流感病毒不僅能夠?qū)е屡：拓i發(fā)病，而且能夠在雪貂和豚鼠中傳播，必須警惕和防范其對(duì)公共安全的威脅。