細(xì)胞:HTSMC細(xì)胞
中文名稱:人氣管平滑肌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:SMCM
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
HTSMC細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
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核糖核酸(RNA)不僅是遺傳信息的載體,【Pan02細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)】還是活細(xì)胞中生命功能的執(zhí)行者,是一類(lèi)重要的檢測(cè)靶標(biāo),在分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)診斷和疾病治療中受到廣泛的關(guān)注。
一般來(lái)說(shuō),【SCC-9細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)】檢測(cè)RNA的方法都需要首先被反轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄形成互補(bǔ)DNA(cDNA),然后在DNA聚合酶的作用下進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)。
研究者發(fā)現(xiàn),幾種DNA聚合酶具有內(nèi)在的反轉(zhuǎn)錄酶活性,【Panc02細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)】即以RNA為模板反轉(zhuǎn)錄為cDNA的能力,并且這種cDNA能直接作為模板進(jìn)行后續(xù)的擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)。
此項(xiàng)研究的發(fā)現(xiàn),【STC-1細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)】突破了DNA聚合酶只能以DNA為模板合成DNA的傳統(tǒng)觀念,為實(shí)現(xiàn)RNA的單酶和一步法檢測(cè)提供了酶學(xué)基礎(chǔ)。
這種一步法檢測(cè)可以大大縮短反應(yīng)時(shí)間,【NRK-49F細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)】降低實(shí)驗(yàn)費(fèi)用,對(duì)核酸的即時(shí)檢測(cè),如血液核酸篩查、檢驗(yàn)檢疫(如艾滋病(AIDS)病毒、埃博拉病毒)等領(lǐng)域具有重要意義。