細胞：FRhK-4細胞

中文名稱：恒河猴胚腎細胞

生長特性：貼壁

培養(yǎng)基：DMEM-H培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

FRhK-4細胞傳代：

1）：細胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據(jù)實際情況，把握消化時間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。

3）：取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。

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研究發(fā)現(xiàn)了一套能夠使成體造血干細胞處于原始狀態(tài)的“主控開關(guān)"。這些開關(guān)密碼的破譯可能使研究人員在將來能夠培養(yǎng)用于癌癥和其它骨髓疾病患者移植的新血細胞。

研究人員不是在基因水平上定位出這種控制開關(guān)，而是在最近新發(fā)現(xiàn)的核酸水平的蛋白質(zhì)生產(chǎn)形式上，即RNA水平。

MicroRNA分子曾經(jīng)被認為是細胞的垃圾，但是現(xiàn)在已經(jīng)知道它是關(guān)閉較大的RNA鏈的蛋白質(zhì)裝配。

干細胞能夠制造對分化成血細胞至關(guān)重要的蛋白質(zhì)，但是microRNA將它們封在了原地。

為了中止蛋白質(zhì)的裝配，microRNA與相配的全長RNA配對，然后折疊并扭曲，從而使這個較長的RNA報廢。但是RNA的配對不是的，并且一個microRNA能夠抓住幾百個RNA鏈，從而高效控制數(shù)百個RNA。

研究人員一直在尋找確定出這些microRNA開關(guān)的方法，從而控制干細胞長成新的血細胞的時間。

為了確定出關(guān)鍵的microRNA，研究人員利用一種專門的計算機軟件篩選了數(shù)千個RNA片斷。

篩選結(jié)果顯示，一套由33種microRNA構(gòu)成的核心開關(guān)能夠與超過1200種較大的不同的RNA相配對，已經(jīng)知道這些較大的RNA對干細胞的成熟非常重要。

目前，研究人員正在利用一種非增殖病毒將33個microRNA的遺傳指令分別插入成體干細胞，從而檢測這些配對預測數(shù)據(jù)是否正確。

然后，他們將會在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)這些細胞。第一個進行檢測的是microRNA-155已經(jīng)被證實能夠終止干細胞發(fā)育成紅血球和白血球。

和期望的一樣，沒有microRNA-155的干細胞成熟了，而攜帶microRNA-155的干細胞則很少能成熟為紅血球和白細胞。