DNA的瓊脂糖凝膠電泳
操作步驟
1、按所分離的DNA分子的大小范圍，稱(chēng)取適量的瓊脂糖粉末，放到一錐形瓶中，加入適量的0.5×TBE電泳緩沖液。然后置微波爐加熱至*溶化，溶液透明。稍搖勻，得膠液。冷卻至60℃左右，在膠液內(nèi)加入適量的溴化乙錠至濃度為0.5μg/ml。
2、取有機(jī)玻璃制膠板槽，有透明膠帶沿膠槽四周封嚴(yán)，并滴加少量的膠液封好膠帶與膠槽之間的縫隙。
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H358細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，HCC827細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H1688細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
3、水平放置膠槽，在一端插好梳子，在槽內(nèi)緩慢倒入已冷至60℃左右的膠液，使之形成均勻水平的膠面。
4、.待膠凝固后，小心拔起梳子，撕下透明膠帶，使加樣孔端置陰極段放進(jìn)電泳槽內(nèi)。
5、在槽內(nèi)加入0.5×TBE電泳緩沖液，至液面覆蓋過(guò)膠面
6、把待檢測(cè)的樣品，按以下量在潔凈載玻片上小心混勻，用移液槍加至凝膠的加樣孔中。
1μl加樣緩沖液（6×）+5μl待測(cè)DNA樣品
〔+0.5μlEB液（10mg/ml）（注：若膠內(nèi)未加EB，可選用此法）?！?/p>
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H1299細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人胚肺二倍體細(xì)胞，2BS細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人支氣管上皮樣細(xì)胞，BEAS-2B細(xì)胞
人乳腺癌細(xì)胞，Hs 578T細(xì)胞
人乳腺癌細(xì)胞，MDA-MB-468-06細(xì)胞
7、接通電泳儀和電泳槽，并接通電源，調(diào)節(jié)穩(wěn)壓輸出，電壓zui高不超過(guò)5V/cm，開(kāi)始電泳。點(diǎn)樣端放陰。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)調(diào)節(jié)電壓使分帶清晰。
8、觀察溴酚蘭的帶（藍(lán)色）的移動(dòng)。當(dāng)其移動(dòng)至距膠板前沿約1cm處，可停止電泳。
9、染色：把膠槽取出，小心滑出膠塊，水平放置于一張保鮮膜或其他支持物上，放進(jìn)EB溶液中進(jìn)行染色，*浸泡約30min。
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞，095-D細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺鱗癌細(xì)胞，SK-MES-1細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H661細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺黏液上皮樣癌細(xì)胞，NCI-H292細(xì)胞
人肺退行性癌細(xì)胞，Calu-6細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺腺癌細(xì)胞，NCI-H1395細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
10、在紫外透視儀的樣品臺(tái)上重新鋪上一張保鮮膜，趕去氣泡平鋪，然后把已染色的凝膠放在上面。關(guān)上樣品室外門(mén)，打開(kāi)紫外燈（360nm或254nm），通過(guò)觀察孔進(jìn)行觀察。
人肺腺癌細(xì)胞 SPC-A1細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺癌細(xì)胞 A549細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 H125細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺癌細(xì)胞 H1299細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺癌細(xì)胞 TKB-1細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺腺癌細(xì)胞，LTEP-a-2細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺腺癌細(xì)胞，Lu-165細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H460細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺腺癌細(xì)胞，SPC-A-1細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
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