DNA的瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳是常用的用于分離、鑒定DNA、RNA分子混合物的方法，這種電泳方法以瓊脂凝膠作為支持物，利用DNA分子在泳動時的電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)，達(dá)到分離混合物的目的。
DNA分子在高于其等電點(diǎn)的溶液中帶負(fù)電，在電場中向陽極移動。在一定的電場強(qiáng)度下，DNA分子的遷移速度取決于分子篩效應(yīng)，即分子本身的大小和構(gòu)型是主要的影響因素。
DNA分子的遷移速度與其相對分子量成反比。不同構(gòu)型的DNA分子的遷移速度不同。如環(huán)形DNA分子樣品，其中有三種構(gòu)型的分子：共價閉合環(huán)狀的超螺旋分子（cccDNA）、開環(huán)分子(ocDNA)、和線形DNA分子(IDNA)。這三種不同構(gòu)型分子進(jìn)行電泳時的遷移速度大小順序?yàn)?cccDNA＞IDNA＞ocDNA
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核酸分子是兩性解離分子，pH3.5是堿基上的氨基解離，而三個磷酸基團(tuán)中只有一個磷酸解離，所以分子帶正電，在電場中向負(fù)極泳動；而pH8.0-8.3時，堿基幾乎不解離，而磷酸基團(tuán)解離，所以核酸分子帶負(fù)電，在電場中向正極泳動。
不同的核酸分子的電荷密度大致相同，因此對泳動速度影響不大。在中性或堿性時，單鏈DNA與等長的雙鏈DNA的泳動率大致相同。
影響核酸分子泳動率的因素主要是：
1、樣品的物理性狀
即分子的大小、電荷數(shù)、顆粒形狀和空間構(gòu)型。一般而言，電荷密度愈大，泳動率越大。但是不同核酸分子的電荷密度大致相同，所以對泳動率的影響不明顯。
對線形分子來說，分子量的常用對數(shù)與泳動率成反比，用此標(biāo)準(zhǔn)樣品電泳并測定其泳動率，然后進(jìn)行DNA分子長度（bp）的負(fù)對數(shù)——泳動距離作標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，可以用于測定未知分子的長度大小。
DNA分子的空間構(gòu)型對泳動率的影響很大，比如質(zhì)粒分子，泳動率的大小順序?yàn)椋篶DNA＞IDNA＞ocDNA但是由于瓊脂糖濃度、電場強(qiáng)度、離子強(qiáng)度和溴化乙錠等的影響，會出現(xiàn)相反的情況。
人肺腺癌細(xì)胞 SPC-A1細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺癌細(xì)胞 A549細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 H125細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺癌細(xì)胞 H1299細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺癌細(xì)胞 TKB-1細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
2、支持物介質(zhì)
核酸電泳通常使用瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠兩種介質(zhì)，瓊脂糖是一種聚合鏈線性分子。含有不同濃度的瓊脂糖的凝膠構(gòu)成的分子篩的網(wǎng)孔大小不同，是于分離不同濃度范圍的核酸分子。
聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺（Acr）在N,N,N′-四甲基乙四胺（TEMED）和過硫酸銨（AP）的催化下聚合形成長鏈，并通過交聯(lián)劑N,N′-亞甲雙丙烯酰胺（Bis）交叉連接而成，其網(wǎng)孔的大小由Acr與Bis的相對比例決定。
瓊脂糖凝膠適合分離長度100至60的分子，而聚丙烯酰胺凝膠對于小片段（5bp-500bp）的分離效果。選擇不同濃度的凝膠，可以分離不同大小范圍的DNA分子。
人肺腺癌細(xì)胞，LTEP-a-2細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺腺癌細(xì)胞，Lu-165細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H460細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺腺癌細(xì)胞，SPC-A-1細(xì)胞 規(guī)格（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
3、電場強(qiáng)度
電場強(qiáng)度愈大，帶點(diǎn)顆粒的泳動越快。但凝膠的有效分離范圍隨著電壓增大而減小，所以電泳時一般采用低電壓，不超過4V/cm。而對于大片段電泳，甚至用0.5-1.0V/cm電泳夜。進(jìn)行高壓電泳時，只能使用聚丙烯酰胺凝膠。
4、緩沖液離子強(qiáng)度
核酸電泳常采用TAE、TBE、TPE三種緩沖系統(tǒng)，但它們各有利弊。TAE價格低廉，但緩沖能力低，必須進(jìn)行兩極緩沖液的循環(huán)。TPE在進(jìn)行DNA回收時，會使DNA污染磷酸鹽，影響后續(xù)反應(yīng)。所以多采用TBE緩沖液。
在緩沖液中加入EDTA，可以鰲合二價離子，抑制DNase，保護(hù)DNA。
緩沖液pH常偏堿性或中性，此時核酸分子帶負(fù)電，向正極移動。
核酸電泳中常用的染色劑是溴化乙錠（ethidium bromide EB）。溴化乙錠是一種扁平分子，可以嵌入核酸雙鏈的配對堿基之間。在紫外線照射BE-DNA復(fù)合物時，出現(xiàn)不同的效應(yīng)。
254nm的紫外線照射時，靈敏度zui高，但對DNA損傷嚴(yán)重；360nm紫外線照射時，雖然靈敏度較低，但對DNA損傷小，所以適合對DNA樣品的觀察和回收等操作。300nm紫外線照射的靈敏度較高，且對DNA損傷不是很大，所以也比較適用。
使用溴化乙錠對DNA樣品進(jìn)行染色，可以在凝膠中加入終濃度為0.5μg/ml的EB。EB摻入DNA分子中，可以在電泳過程中隨時觀察核酸的遷移情況，但是如果要測定核酸分子大小時，不宜使用以上方法，而是應(yīng)該在電泳結(jié)束后，把凝膠浸泡在含0.5μg/mlEB的溶液中10～30min進(jìn)行染色。BE見光分解，應(yīng)在避光條件下4℃保存。
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞，095-D細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺鱗癌細(xì)胞，SK-MES-1細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H661細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺黏液上皮樣癌細(xì)胞，NCI-H292細(xì)胞
人肺退行性癌細(xì)胞，Calu-6細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人肺腺癌細(xì)胞，NCI-H1395細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H358細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，HCC827細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H1688細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，NCI-H1299細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人胚肺二倍體細(xì)胞，2BS細(xì)胞（T25培養(yǎng)瓶@密度75%）
人支氣管上皮樣細(xì)胞，BEAS-2B細(xì)胞
人乳腺癌細(xì)胞，Hs 578T細(xì)胞
人乳腺癌細(xì)胞，MDA-MB-468-06細(xì)胞
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