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中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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培養(yǎng)基及無(wú)菌水的制備，科研人必看！

時(shí)間：2021/11/15閱讀：1180
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　　一、基本原理
 
　　培養(yǎng)基的種類很多，不同微生物所需要的培養(yǎng)基不同。培養(yǎng)基制成后的物理狀態(tài)可分為液體、固體、半固體三種類型。目前所用培養(yǎng)基均為已配制好的生物試劑和紙片。
 
　　二、器材
 
　　三角瓶、試管、燒杯、玻棒、天平、搪瓷杯、量筒、鋁箔紙、角匙、杜氏小管、硅膠塞、電爐
 
　　三、培養(yǎng)基的種類
 
　　營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基、乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基、伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(附加抗菌素)、平板計(jì)數(shù)瓊脂、月桂基硫酸鹽胰蛋白凍肉湯、煌綠乳糖膽鹽肉湯、EC肉湯、高鹽察氏瓊脂、三糖鐵瓊脂等
 
　　四、方法步驟
 
　　1、培養(yǎng)基的制備：
 
　　(1)稱量：根據(jù)培養(yǎng)基的配方，稱取適量藥品于搪瓷杯中；
 
　　(2)溶解：用量筒量取所需水量，置電爐上加熱，一邊攪拌，至*溶解，加熱至沸騰，拔掉電源，待冷卻；
 
　　(3)分裝：根據(jù)不同需要，立即趁熱分裝入三角瓶或試管中，分裝三角瓶以不超過(guò)三角瓶一半為宜，分裝試管一般為管長(zhǎng)的1/5(需根據(jù)試管的大小而定)。液體培養(yǎng)基如乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基約分裝10毫升左右。
 
　　(4)塞硅膠塞：裝好培養(yǎng)基的試管應(yīng)塞上硅膠塞，松緊合適，緊貼管壁，不留縫隙，約1/2塞入內(nèi)，這樣即可過(guò)濾空氣，避免雜菌侵入，又可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)。
 
　　(5)包裝：三角瓶棉塞頭部應(yīng)用錫箔紙包扎，試管集中于試管簍。
 
　　2、無(wú)菌水的制備：
 
　　(1)用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水(稀釋水)裝入試管中。
 
　　(2)用100ml量筒量取95ml蒸餾水(稀釋水)裝入150ml的三角瓶中。可置少許玻璃珠于三角瓶?jī)?nèi)，防止暴沸。
 
　　(3)量取240ml蒸餾水(稀釋水)于250ml的三角瓶中，塞上瓶塞用牛皮紙包扎好，高壓滅菌備用。

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