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上海遠(yuǎn)慕生物詳細(xì)為您介紹谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠 H.P. 的使用方法,注意事項(xiàng)及參數(shù)說(shuō)明等咨訊,本司所供應(yīng)的產(chǎn)品非常多,有ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品,培養(yǎng)基,抗體,生化試劑,化學(xué)試劑,溶液,實(shí)驗(yàn)耗材,瓊脂糖凝膠,各種不同的產(chǎn)品,歡迎訂購(gòu)!
中文名:谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠 H.P.
英文名:Glutathione Sepharose H.P.
供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格:10ml、50ml
保存溫度:4-8℃
操作溫度:4-40℃
分離范圍:70,000-40 ×106
凝膠類型:凝膠過(guò)濾填料,凝膠層析介質(zhì)
應(yīng)用:蛋白、大分子復(fù)合物、病毒、核酸、多糖的分離、分子量測(cè)定。
【谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠 H.P. 】參數(shù)說(shuō)明_使用方法_注意事項(xiàng)
1、不同配基的偶聯(lián)方法與上面類似,但是反應(yīng)的條件例如:配基加入量,反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)溫度應(yīng)根據(jù)配基的不同進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整;
2、可用碳酸鹽、硼酸鹽和磷酸鹽緩沖液做為偶聯(lián)緩沖液,但不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸的緩沖液。
3、產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20%乙醇),通風(fēng)、干燥、清潔的地方。
4、不能冷凍。
5、用過(guò)的柱子貯存在4℃(20%乙醇)。
1、乙醇浸泡:在室溫下,將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時(shí),并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無(wú)鹽水洗去殘存的乙醇濾干;
2、無(wú)鹽水浸泡:室溫下,在無(wú)鹽水中充分溶脹24小時(shí),間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹,然后;
3、鹽酸浸泡:在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時(shí),間隙攪拌,濾干,水洗只中性;
4、將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層;
5、上樣前平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
6、凝膠過(guò)濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱高控制在40-50cm以下,過(guò)高的凝膠層會(huì)引起較大的反壓,應(yīng)當(dāng)盡可能避免;難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時(shí)高徑比為5:1即可;
7、洗脫方法:可以用無(wú)鹽水,也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化;
8、在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白;方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個(gè)柱體積,再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。
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